试剂盒组成

磁珠参数：

此试剂盒所用磁珠为无锡百迈格生物科技有限公司为NGS核酸片段筛选专门开发的磁珠（货号：BMS1000-2）

试剂盒储存条件及稳定性

    试剂盒内组分室温保存即可，在适合的储存条件下该试剂盒未开封使用有效期为2年。

产品简介

  　该试剂盒采用磁珠纯化方式，适用于高通量测序文库(NGS)构建中DNA片段大小快速分选和回收。DNA片段筛选试剂盒的结合缓冲液中含有超顺磁珠，根据磁珠悬浮液和样品的体积比可选择性结合DNA片段。经过磁性分离和乙醇清洗，低盐洗脱缓冲液或无核酸酶水洗脱的高纯度的DNA片段不含有核苷酸，引物，接头，酶和盐等污染物，可被直接用于下游应用，比如：酶切、测序、杂交、PCR反应等后续操作。可应用于手动或自动液体操作设备。

产品优势

1.适合DNA的片段范围广：100bp~50kb；

2.回收率高：回收率高达80%以上；

3.DNA纯度高：回收的PCR产物纯度高；

4.操作快速简单：20min即可完成整个操作流程，无需离心；

5.可适用于自动化、高通量PCR产物纯化。

6.该试剂盒使用步骤和国外BeckmanAmpureXP高度一致，直接替换

7.价格低，订货期短等明显优势。

产品原理

图1(核酸纯化试剂盒大致工作原理）

自备仪器和试剂

1.磁力架（建议使用百迈格生物磁力架，货号：BMB16-0.2）。

2.洗涤液：80%乙醇水溶液。

3.洗脱液：BufferEB（10mMTris-HCl，pH8.0）；或者RNase-FreeWater。

操作步骤

请参考BeckmanAmpureXP产品，直接替换。

性能实例：

1.核酸片段筛选测试：

测试目的：通过DNA片段筛选测试自主研发试剂盒与国外进口试剂盒性能差异

1）测试平台：安捷伦2100生物分析仪

2）实验方法：将大片段DNA打断后添加磁珠纯化试剂盒进行片段筛选，运用两步法对样品进行核酸片段筛选回收

图2如下：

 图2，安捷伦2100生物分析仪片段选择对比测试结果：自主研发试剂盒与国际商品化品牌AmpureXP试剂盒核酸片段回收对比（左图为AmpureXP品牌核酸纯化试剂盒安捷伦2100生物分析仪检测回收核酸平均片段大小，平均片段大小为265；右图为自主研发核酸纯化试剂盒利用安捷伦2100生物分析仪检测回收核酸平均片段大小，平均片段大小为265；）对比结果十分接近。

2.DNA回收效率测试

测试目的：检测对DNA片段的回收效率

实验方案：大片段DNA打断后，经试剂盒一步法纯化后（1.8X）测试DNA回收效率

表3如下：

 由表3可以看出，DNA回收效率测试结果相近，都达到80%以上。

3.主流测序仪测序测试

测试目的：通过市面上主流基因测序仪平台检验试剂盒稳定性

1)测试平台：Proton测序平台

2)实验步骤：生物样本提取出核酸后进行文库制备+上机测序

3)核酸样品总数12个：6个对照品，6个测试品，其中文库制备部分，分别采用本公司自主研发的纯化试剂盒和AmpureXP商品化试剂盒进行核酸纯化。

表4如下：

根据表4体现的Proton测序分析结果看，表4中的唯一比对率与原始数据积累平均值越高越好，GC含量平均值对照组与测试组均符合标准。经测试结果分析，自主研发核酸纯化试剂盒对比进口商品化试剂盒性能相差无异，能够有效的替代进口的磁珠纯化试剂盒。