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最近在构建质粒，遇到奇怪的问题，向大牛们求助！！通过CDNA文库扩增目的基因片段后连接至载体上，转化后挑取克隆进行菌落PCR鉴定，选择阳性菌落扩增后提取质粒，再将质粒酶切鉴定，选择酶切结果正确的质粒送测序，通用引物测序结果显示上游测序结果为载体序列，无目的基因序列，下游引物无信号？！崩溃了，为嘛！我同一批做的其他几个质粒都没有问题，这个质粒构了两次了都这样。。。欲哭无泪啊，求大神们慷慨相助！！
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回复：时间：2021-08-02
我用了很多年的病毒载体，各种病毒也包过非常多，欢迎大家来我的病毒包装与质粒转染精华答疑贴答疑贴子链接：腺相关病毒包装（AAV）、慢病毒包装、腺病毒包装、细胞转染、病毒在体转染【技术答疑】
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