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Bst DNA聚合酶

mayitao /发布时间:1557453235 /浏览量:50

货号：	X10066
规格：	8000U/800U

浓度：8U/ul
储存条件：-20℃
热失活：80℃，20min
产品购买咨询：18511897367

简介：
BstDNA据聚合酶是从Geobacillus中克隆得到的耐热DNA聚合酶。本产品缺失了5’-3’和3’-5’的核酸外切酶活性，比传统链置换酶具有更强的链置换活动，从而使得本产品在等温扩增实验中表现更加的出色。本产品是通过大肠杆菌表达的重组酶，分子量大小为67kDa。
单位定义：
1单位活力定义为在65℃，30min内，将25nmoldNTP掺入到酸不溶物质中所需要的酶量。
酶保存液成分：
10mMTirs-HCl，50mMKCl，0.1mMEDTA，50%甘油，pH7.1@25℃。
产品特点：

热稳定性高，最适反应温度为50-68℃。
抗逆性好，对非离子表面活性剂和高盐环境的耐受性高。
链置换活性高，无核酸外切酶活性。

酶蛋白性质描述：
蛋白纯度：＞99%
酶活性：5000U/mg。
宿主核酸残留：2000U酶中，未检出
单链核酸外切酶：2000U酶中，＜2.0%
双链核酸外切酶：2000U酶中，＜0.5%
双链核酸内切酶：2000U酶中，未检出
应用范围：

在二代测序（NGS）应用中，主要用于文库构建中的链置换反应。
其他等温扩增实验
应用于在纳克数DNA模板量条件下对其测序
应用于在GC含量较高DNA区域测序

试剂盒组分：

名称	规格1	规格2	规格3	其他
BstDNA聚合酶	1600U	8,000U	80,000U	可定制
10*BstReactionbuffer	0.7ml	3ml	30ml
100mMMgSO₄Solution	0.5ml	2ml	20ml

1*BstReactionbuffer：
20mMTris-HCl；10mM(NH₄)₂SO₄；50mMKCl；2mMMgSO₄；0.1%Tween®20；pH8.8@25℃
注：镁离子的反应浓度可在2-10mM之间调整。

使用方法：

成分	25ul体系	终浓度
10*BstReactionbuffer	2.5ul	1×（包含2mMMgSO₄）
100mMMgSO₄Solution	1.5ul	6mM（总量8mM）
dNTPmix（10nM）	3.5ul	1.4mMeach
primer-1（25×）	1ul
primer-2（25×）	1ul
primer-3（25×）	1ul
primer-4（25×）	1ul
BstDNA聚合酶	1ul	320U/ml
DNAtemplate		＞10copies
Nuclease-freeWater	To25ul

note：

设置无模板阴性对照，保证扩增特异性。
对反应产物进行分析时，建议建立分离区域以避免污染。
若需要体系优化，请保证在Mg²^＋浓度在4-10mM之间，Bst酶浓度在40-320U/ml之间，反应温度在50-68℃之间。
BstDNA聚合酶不能用于热循环测序和PCR。
BstDNA聚合酶缺失5’-3’和3’-5’的核酸外切酶活性。

温馨提示：不可用于临床治疗。

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