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细胞周期的DNA检测
Ⅰ、样品准备 准备以下一种或几种样品A、组织单细胞悬浮液(如淋巴腺、脾、骨髓、胎盘细胞)B、组织培养细胞C、Ficoll-hypaque分离的单核细胞Ⅱ、反应体系-DNA低渗缓冲液柠檬酸三钠 0.25gTriton-X1000.75mlPropidiumiodide0.025g核糖核酸酶 0.005g蒸馏水 250ml我们将该DNA低渗溶液于密闭瓶子中存放数月后并无发现有任何染色活性的丢失Ⅲ、染色1、每一个管子中放入1×106个细胞;2、样品离心后尽可能完全地移去上清液,并且不要打碎沉淀块;3、入1ml的DNA低渗染色缓冲液至沉淀中,并混匀;4、样品于4℃下避光30分钟或最长不超过1个小时以备流式细胞仪分析。注意:延长在低渗缓冲液的曝光时间会引起样品碎片的增加。
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