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Spectrophotometric Analysis of rRNA
蚂蚁淘
/发布时间:1545759422 /浏览量:161
SpectrophotometricAnalysisofrRNA
LEVELI
Materials
- RNA
- UVspectrophotometerandcuvettes
- Alkalinedistilledwater
Procedure
- Dissolve10mgofcommercialRNAin250ml.ofslightlyalkalinedistilledwater.Useavolumetricflaskandproperanalyticaltechnique.Thiswillgiveastandardsolutionof40microgramsRNA/ml.
- Prepareaseriesofdilutionssothatyouhave40,20,10,5and2.5microgramsofRNAperml.
- TurnonaUVspectrophotometerandadjustthewavelengthto260nm.Usethealkalinewatertoblankthespectrophotometerat260nm.
- ReadtheA
ofeachofthestandards.PlottheAvstheconcentrationofRNAandcalculatetheextinctioncoefficient. - Dissolveyourisolated,precipitatedRNAin10.0mlofalkalinewater.Prepareaserialdilutionfor1/10,1/100,1/1000and1/10000.Measuretheabsorbanceofeachat260nmand,usingthedilutionwhichgivesareADIngbetween.1and1.5absorbanceunits,computetheconcentrationofRNAinyoursample.
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