相关文章
促销商品
最新问答
- [04-27]OMEGA Total RNA 提取试剂盒中文步骤.doc原创力文档
- [07-28]【求助】Trizol法提取RNA时各试剂的作用 核酸基因技术论坛
- [07-07]RNA甲基化测序文库的构建方法技术,全基因组甲基化测序专利_技高网
- [07-30]求推荐好用的血清RNA提取试剂盒【生物吧】
- [08-01]培养细胞RNA的提取(采用Trizol试剂盒提取RNA) 实验方法
- [07-26]微量RNA的cDNA PCR文库的构建
- [07-21]春节先做什么,接着做什么,然后做什么,最后做什么用英语写刷刷题
- [10-01]RNA提取 | RNA提取试剂 | RNA试剂盒 | Beckman 贝克曼 贝克曼...
- [10-03]几种提取RNA的方法_
精选品牌
热卖商品
mRNA的提取及纯化实验一磁珠法
蚂蚁淘
/发布时间:1626802201 /浏览量:334
================ 蚂蚁淘在线 ================
免责声明：本文仅代表作者个人观点，与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实，对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺，请读者仅作参考，并请自行核实相关内容
版权声明：未经蚂蚁淘在线授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的，应该授权范围内使用，并注明“来源：蚂蚁淘在线”。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。
相关阅读
-
资质认证
获得国家资质，权威认证！
-
全国联保
全国联保，官方无忧售后
-
正规发票
正规发票，放心购买
-
签订合同
签订合同，保障您的权益
| 实验材料 | mRNA |
|---|---|
| 试剂、试剂盒 | mRNA分离试剂盒异丙醇NaAC |
| 仪器、耗材 | |
| 实验步骤 | 一、生物素标记的Oligo（dT）探针与mRNA的煺火 1. 在DEPC处理过的1.5mlEppendof管中，加入0.2-1mg的总RNA和无RNase的水至终体积为0.5ml。 2. 65℃加热10min。 3. 加入2μl生物素标记的Oligo（dT）探针和12μl的20×SSC于RNA中轻轻混匀，室温放置，逐渐冷却平衡至室温，此步操作一般需10min。 二、亲和素顺磁磁珠（SA-PMPS）的冲洗 1. 将SA-PMPS轻晃开后，放入磁性分离架中，使SA-PMPS集中于试管一则（约30秒），小心去除上清（不用离心方法）用1.5ml0.5×SSC漂洗SA-PMPS，用磁性分离架集中磁珠，去除上清，漂洗3次。 2. 将漂洗过的SA-PMPS重新悬浮于0.2ml0.5×SSC中。杂交体的生成及漂洗。 3. 将上步“3”中褪火的生物素标记的Oligo（dT）探针，全部加到上步“5”管中，轻轻混匀，室温放置10min。每隔2分钟轻轻混匀一次。 4. 用磁性分离架捕获磁珠，吸弃上清。 5. 用0.3ml0.1×SSC漂洗SA-PMPS，用磁性分离架集中磁珠，吸弃上清，漂洗4次。 三、洗涤收集mRNA 1. 将漂洗过的SA-PMPS重新悬浮于0.2mlDEPC水中。 2. 用磁性分离架捕获磁珠，将洗脱的水相吸至一新管中。重复洗涤一次，吸取水相，两次水相合并（约0.25ml） 3. 在洗脱液中加入0.1体积的NaAC，1体积的异丙醇，-20℃沉淀过夜，12000g离心10min，75%乙醇洗沉淀，真空干燥。 4. 提取mRNA质量的分光光度计检测，将所提mRAN分别在260，280nm比色，要求A. OD260%/OD280%不小于2.0及40μg所提样品在OD260%的值为1。 5. 提取mRNA质量的电泳检测，在1%的变性胶上，EB染色后，mRNA应在0.5-8Kb间均匀着色，1.5-2Kb间着色较强。 |