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这样可不可以?
另还有几个问题:1、这样的裂解液裂解线粒体提蛋白可不可以
2、裂解液加多少剂量
3、12000g离心10min和30分钟有没有区别
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回复:时间:2006-11-24
提出脑线粒体后,从你裂解液的配方看,你是想做双向电泳吧。上面的配方适合提取线粒体总蛋白,但是要注意几点:1。加入裂解液后,最好在冰浴中静置10-20分钟,使线粒体膜被充分裂解。2。最好在加入裂解液后超声,100W,6s,4次,这样可大大增加线粒体内蛋白的释放。但功率不能太大,否则部分蛋白会降解。3。最好用25000g离心,一般30min-60min内均可。4。加入裂解液的量,决定你最终的样品液浓度。一般200-400ul就行了。当然,你最好制得样品后立刻定量,再根据你2DE的上样量将蛋白分装保存。
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回复:时间:2006-11-19
你好,楼主!我也想买载体两性电解质PH3-10,可是问了几家公司,他们25ml都要三千多元,而且没有分装。我想请问楼主,你们的是那家公司定的,有分装的吗,大概价格多少。谢谢!
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