在已有的ChIP级别抗体中，如何选择最高特异性的ChIP抗体，虽然很多厂家都能够提供ChIP级别抗体，但是在2011年的一篇Nature文献报道中显示即使ChIP级别的抗体，结合特异性也只有70%左右，我如何选择高特异性的ChIP级别抗体？

ChIP实验中抗体的选择是实验成功的核心要素。在2011年NatStructMolBiol[1,2]报道中通过斑点杂交和ChIP-chip试验显示，分别只有73%和78%的抗体具有较好特异性（图1，图2）。作者进一步通过WB检测3个品牌表观抗体的特异性，仅有一个品牌（Millipore）抗体通过特异性检测（图3），另外两品牌抗体未通过特异性结合实验。

(a)  Westernblotofanti-H3K4me2(Millipore,07-030,lotDAM1543701),anti-H3S10ph(Wako,303-35199),andanti-H4K20me3(Diagenode,CS-057,lotA9-002). 

针对这种情况给大家推荐一个非常好的方法，通过全球最大抗体查询网站CiteAb（http://www.citeab.com/）进行查询，能够获得每个ChIP抗体的文献引用次数（CiteAb显示Merck旗下多种表观遗传抗体全球使用率排名第一）

ChIP实验中需要选择ChIP级别抗体，没有ChIP级别抗体该怎么选择？如果我的实验种属比较特殊（果蝇，昆虫，植物等）该怎么选择ChIP实验抗体？

但是由于ChIP级别（ChIP验证）过的抗体数量非常有限，所以当没有ChIP级别抗体时，我们有如下3种方法可以考虑：

选择IP/IHC/ICC进行尝试，一般在这些实验中抗体对蛋白的识别结构是native，和ChIP抗体识别结构较为相似；不建议尝试Westernblot抗体，因为WB抗体识别的蛋白结构多是denature，并不适合ChIP实验；

将蛋白的序列放在NCBI上进行Blast，如果蛋白序列同源性与其他种属或物种蛋白超过80%，可以尝试跨物种抗体；

可以使用标签抗体，但是标签页可能干扰转录因子并可能引入假阳性相互作用，因此需要设置好对照，包括未转染细胞的mockIP对照；以及将标签从N端转换到C端作为对照。

如果您的实验种属非常特殊（果蝇，拟南芥等），默克（Merck）公司技术服务部门（400-899-1988-2-2），能免费提供高质量的比对服务，针对不同种属的ChIP抗体，验证成功率在90%以上。

Upstate（Merck子品牌）：

表观遗传及信号通路研究领跑者

1990,推出全球首款ChIP试剂盒（>50000篇文献引用）；

2009，推出全球首款RIP试剂盒（>7000篇文献引用）；

2010，全球20000篇文献使用Merck表观抗体；

2010，推出全球首款EZ-ChIP试剂盒；

2014, 推出全球首款NuclearRIP试剂盒；

2014，推出全球首款最高灵敏度ChIP试剂盒

2015， 推出全球首款ChIRP试剂盒