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性染色质检测实验一荧光染色显示Y染色质法

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实验方法原理	在间期细胞核中，女性X染色质和男性Y染色质均可用特殊染色法显示出来。女性的两个X染色体中的一个，在间期时的染色质呈异固缩（Heteropyconosis），呈深染的小体称Barr氏体。Barr氏体位于间期细胞核内面，呈三角形或半月形小体，易为碳酸复红或硫堇等染料着色。正常女性Barr氏体阳性，男性为阴性。男性Y染色质位于间期细胞核近中央部，易为盐酸阿的平着色，荧光显微镜下观察发较强荧光，呈点状小体，发光部分系Y染色体异固缩的长臂。初代培养细胞和二倍体细胞株均可观察到性染色质，传代细胞系表现不规律。
试剂、试剂盒	SorensenPBSAtebrine
实验步骤	一、染色步骤 1. 细胞盖片培养细胞用37℃的BSS漂洗后，立即投入染色液内染色5～10分钟（亦可先固定再染色）；如用涂片标本则应待涂片干后，迅速投入96%酒精固定10～15分钟后再染色； 2. 分化用96%酒精分化1分钟，分化时要不断摇动，把片子上多余的染料漂洗掉； 3. 脱水通过纯酒精1分钟； 4. 封片二甲苯透明2～3分钟，树胶封固。二、结果在荧光显微镜下观察，Y染色质呈特别明亮黄绿色荧光圆点，直径0.25～0.3微米，可位于核内任何位置，但以近中央时居多。