一、材料

1.缓冲液与溶液

溴化乙锭（200μg/ml)

甲醛

甲酰胺

10X甲醛凝胶电泳加样缓冲液

10XMOPS电泳缓冲液

2.凝胶

含有2.2mol/L甲醛的琼脂搪凝胶

3.核酸和寡核苷酸

RNA样品

RNA大小参照物

4.专用设备

水平电泳仪

透明直尺

55℃水浴

二、方法

1.在一灭菌的微量离心管建立变性反应

RNA（多达20μg）        2.0μl

10XMOPS电泳缓冲液    2.0μl

甲醛                              4.0μl

甲酰胺                           10.0μl

溴化乙锭（200μg/ml）  1.0μl

2.盖紧微量离心管的盖子，于55℃温育RNA液体60min，在冰水中冷却样品10min，然后离心5s并将所有的液体在微量离心管的底部沉淀。

3.加2μl10X甲醛凝胶加样缓冲液并将试管重新置于冰上。

4.将琼脂糖/甲醛凝胶装入水平电泳槽中，加入足够1XMOPS电泳缓冲液覆盖凝胶约1mm。电泳5min(5V/cm)。加RNA样品到凝胶加样孔中，将空胶两侧的两条最外侧的泳道留下，加样RNA标准大小参照物。

5.凝胶浸入1XMOPS电泳缓冲液中，4~5V/cm电压下进行电泳，直到溴酚蓝移出约8cm(4~5h)。电泳时用较高电压会导致条带模糊不清。因为电泳缓冲液的pH值在电泳过程中会发生变化，装好电泳槽，缓冲液通过蠕动泵不断从一个室到另一个室。每隔一个小时更换一次缓冲液。

6.将凝胶放置于一片Saran膜上在紫外线透射仪上观察RNA将染色凝胶和紫外线透射的照片用透明的直尺对比。

7.照像并测量照片上每个RNA条带至加样孔的距离，以RNA片段大小的对数值对RNA条带的适移距离作图，用所得曲线计算从凝胶转移到固相支持体后通过杂交计算出RNA分子的大小。

8.通过上或下毛细管转移固相化的RNA到固相支持物上。