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如果只是为了缓冲酸碱度,是不是可以用一种缓冲液来代替所有其他的?这样做试验就方便多了。谢谢指教
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回复:时间:2004-04-12
缓冲液的选择要根据你样品的性质,因为Tris,triethanolamine,HEPES和磷酸缓冲液等它们都有一定的pH缓冲范围,首先要考虑你的样品适合在哪一个PH范围,同时要考虑这些不同的缓冲离子会不会对你的样品有没有其它影响。
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回复:时间:2004-04-12
你可以查查一对缓冲系统的PKA值,通过PKA值就可以推算出其最佳的缓冲PH值,在这个PH点附近其缓冲能力最强,超出这个点很多则缓冲系统的缓冲能力就很低了,例如,你要维持的PH在7.4左右一般选PBS,醋酸和醋酸钠构成的缓冲系统其PH就要低。另外的选择就是上面的斑竹们说的,看缓冲离子对你的实验有没有影响了。
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回复:时间:2004-04-13
酶液缓冲一般常用PBS和Trisbuffer.--------------------------------------------------------------------------------jinkui960战友正在申请中级,请点击支持!jinkui960申请中级成功,谢谢战友们的支持!-蚂蚁淘论坛
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回复:时间:2004-04-12
今天刚学习了一下,巩固,希望能有用(主要是在酶学中,其他的实验有参考性):选择buffer应考虑一下几方面:1,缓冲离子的酸解离常数pKa值,需接近所需Ph,一般不要超过一个PH,因这时缓冲能力最强!如Tris的pKa=8.08,用它适合配制ph=7到9的buffer2,如测酶,buffer需对酶无抑制作用3,buffer需不参与酶促反应4,buffer不降解体系中成分5,buffer可因稀释或温度变化等影响ph,应加以考虑6,如用于吸光值等的测定,buffer应在可见光区或紫外光区没有或只有极低的吸光值
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回复:时间:2004-04-11
缓冲离子的解离常数pKa值=所需Ph缓冲能力最强。蛋白质试验中应该严格避免缓冲液与蛋白质发生不良反映。一般使用最低的浓度,以避免非特异性的离子的影响。凝胶过滤时大多数缓冲液可以使用。阴离子分离层析阳离子缓冲首选Tris反之用磷酸盐缓冲液。
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