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因为是考察不同PH对药物的影响,样品又不好改变其PH值,这种情况怎么办?希望有经验的高手指教。
我的流动相是甲醇-水(90:10)
谢谢赐教!
请进子版按格式发贴,自行修改,谢谢。
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回复:时间:2021-07-28
同意h12345和sunqingw看法,不同品牌的柱子都有pH适用范围,超过这个范围对柱子会有损伤:高pH时硅胶易溶解,低pH则一些键和填料表现为化学不稳定.目前这种情况你有两种选择1.就如同sunqingw所说,在进样前将样品调至中性pH2.选用宽pH范围色谱柱
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回复:时间:2021-07-31
除了以上几位说道色谱柱耐受的ph范围外,我想还是从您的试验目的上考虑一下:您是考察样品在不同ph值的稳定性,和我们做质量研究时的破坏降解试验如出一辙,不知您的试验过程是如何设计的。一般我们的做法是取适量样品,加入定量的酸、碱、氧等试剂,然后于特定的环境下放置(高温、或室温)一定的时间后,取样,将酸、碱样品用适当试剂调节pH值为中性,再进样HPLC。因为样品在为调中性前已经受破坏,而在进样前调节中性也不会改变其杂质峰的色谱行为(肯定不会我也不能保证,但是基本没影响)。另外一点,您的流动相里没有缓冲液,所以直接进样强酸强碱溶液还是不妥,出不出问题也难说,皮实的柱子完全没有问题,我因为偷懒在做上面说到的破坏试验时从来不调。但也有很多同行反应说有因此毁柱子的。
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回复:时间:2021-07-28
我们在做中药材含量测定时,由于是粗提,柱效下降很快,为了提高柱效,使用一段时间后用25%乙酸直接冲柱子,甚至是用冰醋酸,再用纯水冲洗,能够解决问题,当然时间不会长,20分钟左右,样品是强酸或强碱,进样量是很少的,很快被流动相稀释,个人认为对柱子形象不会很大。
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回复:时间:2021-07-24
C18柱的酸碱度一般在说明书上都有,你自己注意一下就是了,我刚用的柱子是一进口柱子,其pH范围是2.0~7.5,不过最好不要达到它的最低极限,那样的话对柱子的损害很厉害,一定要小心喽。
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