一、材料

1.缓冲液和溶液

2.5XSDS-EDTA染料混合物

2.酶和缓冲液

DNaseⅠ稀释缓冲液，胰DNaseⅠ(1mg/ml)

3.凝胶

琼脂糖凝胶（0.7%)，用0.5XTBE，含0.5μg/ml溴化乙锭

4.核酸和寡核苷酸

λ噬菌体DNA(对照DNA)

5.专用设备

预置于65℃的水浴

6.载体和菌株

λ噬菌体裂解物或原种

二、方法

1.按如下方法配置胰DNaseⅠ的工作液（1μg/ml)：1μlDNaseⅠ储液加1ml冰冷的DnaseⅠ稀释缓冲液进行稀释。

2.将封口的试管轻轻上下颠倒数次使溶液混匀，注意别产生气泡和泡沬。在使用前将工作液贮存于冰浴中，用后舍弃。

平板裂解物的粗制品得到一条清晰的λ噬菌体DNA带。但是，液体裂解物一般含细菌DNA片段，在琼脂糖凝胶中将干扰噬菌体DNA带。在用SDS和EDTA处理释放λDNA之前，先用胰DNaseⅠ处理噬菌体颗粒，将能避免该问题的产生。

3.将10μl噬菌体裂解物或原种的粗制品转移至一微量离心管中，加1μl胰DNase工作液，37℃温育30min。

4.加入4μl2.5XSDS-EDTA染料混合物，65℃温育5min。

这一步使噬菌体的外壳破裂，释放病毒DNA，同时使DNase失活。

5.将样品上样于含0.5μg/ml溴化乙锭的0.7%琼脂糖凝胶中。

用5ng、25ng和100ng的λ噬菌体DNA作对照。

6.在小于5V/cm的电场下电泳，直到溴酚蓝迁移3~4cm。

如果电压太高，DNA带将出现拖尾现象。

7.在紫外线下观察凝胶。用标准DNA的荧光密度作对照，估算测试样品中λ噬菌体DNA的量。

10μl的高滴度裂解物应含有10~50ng的噬菌体DNA。