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回复:时间:2004-01-24
原理:非显带染色体除可根据形态分辨部分染色体,其他多数染色体难以确认,而显带技术则可使染色体纵向长度上出现不同条纹,以辨认全部染色体。GTG即G带,Trypsin(胰酶),Giemsa的简写。Giemsa染料是噻嗪——曙红染料,染色体的着色有赖于在原位形成噻嗪——曙红(2:1)的沉淀物。着色首先取决于二个分子同DNA的结合,在此基础上再结合一个曙红分子,其次取决于一个疏水环境,以利于染料沉淀而着色。通过胰酶的显带预处理可除去阴性G带区的疏水蛋白,或使它们的结构变成更疏水状态。由此可知,在G显带中抽取的蛋白往往是疏水的,且主要来自阴性G带区。操作步骤:1、标本老化:按常规制备人外周血淋巴细胞染色体标本(未染色)气干后,经78度烘箱2-3小时。取出置37度恒温箱3天后预处理。2、胰酶预处理:将染色体标本浸入胰酶溶液(已置4度冰箱稳1小时以上)中40-50秒,取出立即水洗去多余胰酶。3、Giemsa染色:1:10Giemsa染色液染色5-10分钟,洗去多余染料,气干。4、镜检:油镜下可见分散良好的染色体纵轴上呈现深浅不同带纹,即为可读标本。注意事项:常规制备的染色体标本,要有较多分裂相,分散良好,染色体长度适中。GTG带的关键在于胰酶处理的时间。若染色体仍着色较浅,带纹不明,则预处理时间不足,应延长预处理时间;若染色体变粗并显出毛糙边缘,甚至呈糊状,则为预处理过度,应适当缩短处理时间。Giemsa染色时间要适中,时间短,着色不够,深浅带反差小;时间过长,着色深,亦影响带纹反差,不易识别。
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回复:时间:2004-01-19
1.郭慕依教授主编的《病理学》(上海医科大学出版社,1994)2.病理学(第2版)ISBN:7-5627-0614-X/R.583条码:出版日期:2001-02-01作者:郭慕依叶诸榕主编出版社:复旦大学出版社
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