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酵母双杂交检测实验技术服务
提供商: | zoonbio |
服务名称: | 酵母双杂交检测实验技术服务 |
蛋白的酵母双杂交实验是以酵母的遗传分析为基础,研究反式作用因子之间的相互作用对真核基因转录调控影响的实验,同以往研究蛋白质-蛋白质之间相互作用的实验手段相比,酵母双杂交系统具有其独特优势。
1、融合体蛋白之间的相互作用是在真核酵母细胞内进行,蛋白质保持天然的折叠状态,这是其他离体生化检验方法所缺乏的,它所证实的蛋白质间相互作用将更接近于体内的真实水平。
2、双杂交系统的敏感度非常高,蛋白质之间结合常数低至1mmol/L时都可以被侦测。
3、在筛选cDNA文库时,双杂交系统能够简捷地得到编码相互作用蛋白的基因序列,它只需构建质粒而不必准备抗体或纯化蛋白,省略了其它体外检测蛋白之间相互作用方法所必须的蛋白抽提、纯化等繁琐步骤。

酵母双杂交实验原理
以Gal4系统为例,BD和AD分别由Gal4蛋白上不同的两个结构域(1-147aa与768-881aa)构成。在利用GAL4系统筛选cDNA文库或研究蛋白间的相互作用时,DNA结合结构域与靶蛋白即"诱饵"相结合,转录活化结构域与文库蛋白或要验证的蛋白相结合。一般情况下,单独的BD可以与GAL4上游活化序列(GALUAS)结合但不能引起转录,单独的AD则不能与GALUAS结合;只有当BD与AD分别表达的融合蛋白由于相互作用而导致两者在空间上相互靠近时,BD与AD才能与GALUAS结合并且引起报道基因的转录,从而激活下游报告基因,通过这一系列实验来验证两个蛋白之间的相互作用。
酵母单/双杂交检测服务项目列表
服务项目 | 服务说明 | 周期 | 报价 |
酵母单杂交文库构建技术服务 | 基于重组方法的文库构建方案 | 4-6周 | 询价 |
酵母单杂交文库筛选技术服务 | DNA—蛋白质相互作用 | 12-15周 | |
核蛋白体系酵母双杂交文库筛选技术服务 | 基于pDEST22或pGADT7系统 | 14-16周 | |
膜蛋白体系酵母双杂交文库筛选技术服务 | 基于分离的泛素介导的膜蛋白酵母双杂交系统 | 14-16周 |
详细信息:http://www.zoonbio.com/service/protein-analysis-yeast-two-hybrid.html
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