双杂交系统

2021-08-11【求助】急!酵母双杂交系统筛选平板的相关问题?

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我现在正在进行酵母双杂交实验.在做自激活检测时,发现SC-ura-trp-his的平板具有自激活效应,但是选择用SC-ura-trp-ade的平板进行酵母双杂筛选时,由于平板过于严苛,而没能筛选到转化子;现在想用添加3-AT作为抑制剂的SC-ura-trp-his平板进行筛选,现在想请实验高手们给予指导,3-AT的浓度为多少比较适宜???谢谢大家!:)
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回复:时间:2021-08-20

所需的3-at浓度需要做预试验来优化,就是配制一系列含有不同浓度3-at的板子,以阴性对照刚好张不出来的那个浓度为宜。操作手册上应该有说明的,你仔细看看。

已帮助 0

回复:时间:2021-08-11

谢谢啊!海相问个问题:你所指的操作手册是什么?我没有看到过相关的东西啊