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第一次建CDNA文库，用的是Clontech的PCRcDNAsynthesisKit，通过LDPCR获得cDNA二链后割胶分级回收连接PMD-18T载体，最后PCR检测，得到的片段大部分集中在500bp左右，只有少量的大于1kb，请各位大虾帮忙看看是不是因为T载体不适合做cDNA文库还是因为质粒cDNA文库的容量问题，还是其它什么原因？多多赐教，不胜感激！
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回复：时间：2007-01-30
谢谢楼上的。还有一个问题请教一下，如果小片段优先插入，那载体够多，大片段也应该插入才对，而我的小片段很多，大片段很少（随机挑单菌落PCR检测）？更不可思议的是割胶回收的长片段中检测到的也是大部分是短片段，不知道是什么原因，请各位大虾帮忙啊！
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