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自行配制DMEM的方法及说明书
这里是一份Gibco的低糖DMEM粉剂配制说明(普通高糖的DMEM培养基配法是一样的):TOPREPARE1*LIQUID1.Measrueout5%lessdistilledwaterthandesiredtotalvolumeofmediumusingamixingcontainerthatisasclosetothefinalvolumeaspossIBLe.2.Addpowderedmediumto15to30℃(roomtemperature)waterwithgentlestirring.(Donotheatwater)3.Rinseoutinsideofpackagetoremovealltracesofpowder.4.Add3.7gofNaHCO3perliterofmedium.5.Dilutetoadesiredvolumewithwater.Stiruntildissolved.(Donotover-mix)6.AdjustpHofmediumto0.2-0.3belowdesiredfinalworkingpH*useofINNaOHorINHClisrecommended.(Addslowlywithstirring)AfterpHhasbeenadjustedkeepcontainercloseduntilmediumisfiltered.7.Sterilizeimmediatelybymembranefiltration.(Positivepressurerecommended)*pHunitewillusuallyrise0.1-0.3uponfiltration.另外,在李玲、李雪峰编著的《细胞生物学实验》(湖南科学技术出版社)中配制方法如下:1制备新鲜三蒸水或Millipore超纯水。2称取所需量的干粉培养基,加入约终体积一半的三蒸水中;若配制一个包装的培养液,在将整个包装的干粉倒入三蒸水后,需用水洗包装袋内面2次,倒入培养液中,以保证所有干粉都溶解成培养液。磁力搅拌或人工搅拌使之完全溶解。3根据包装袋上的要求补加所需量的碳酸氢钠;根据实验需要,添HEPES(5-20mmol/L)、谷氨酰胺和其他特殊物质。4加水定容到终体积。5必要时用1mol/L盐酸和1mol/L氢氧化钠调节pH。6用无菌0.22um滤膜过滤除菌,分装于无菌血清瓶中,4℃冰箱保存。配制好的培养液用前加入100U/mL青霉素和100U/mL链霉素,并根据需要加入血清(5%-20%)。
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