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IgG抗体纯化实验一备选方案
实验材料 | 抗体 试剂、试剂盒 | SAS 仪器、耗材 | 透析膜离心机
实验步骤 | 2. 于4℃下透析样品40h,中间换2次加样缓冲液(每次换大约4L)加样上柱,速度为10ml/h。用3倍柱床体积的加样缓冲液以10ml/h的速度洗脱未结合的蛋白质。 3. 用洗脱缓冲液以10ml/h的速度洗脱结合的IgG组分,以10ml为一组分分部收集洗脱液,并贮存于4℃,直至合并各组分。 4. 每组分取30~50μl,用10%SDS-PAGE在还原条件下检测组分中是否含有IgG,合并含有IgG的组分,在4℃下透析大于40h,期间换2次缓冲液。 5. 用5倍柱床体积的加样缓冲液重新平衡DEAE-Affi-GelBlue柱,加少许NaN3晶体,贮存于4℃。
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