相关文章
- 锂化技术在锂离子电池中的最新研究进展及其在高比能硅负极 .....
- 酶的分离纯化方法简介 专区
- 产品展示_第(48)页
- 【动物检测毕特博】 MoBiTec品牌的载体表达系统的产品价...
- 谁在做这个实验:固相化金属亲和层析法纯化蛋白质实验 实验方...
- [CSC2017]许予明：缺血性脑卒中复发预后的评估_缺血性...
- 一次性医用消毒包装袋强度所需检测仪器选购指南山东德瑞克仪器....
- 肿瘤相关基因的筛选策略
- 化学药品纯度分为几个等级?纯度个是多少?怎样标记? – 96...
- 核酸亲和层析法纯化蛋白质实验1
- 生物化学实验DEAE纤维素离子交换层析法分离血清蛋白
- cDNA法推断蛋白质的一级结构实验
促销商品
最新问答
- [08-11]免疫组化SP法与SABC
- [07-24]什么是包被抗原?它和免疫抗原有什么区别?越详细越好! 分子生物...
- [10-03]国产ELISA试剂盒哪家好?
- [08-08]【求助】 冰冻切片SABC及免疫荧光的问题 实验动物 专业医生...
- [08-12]Western blot实验方法、步骤、介绍/Western blot protocol/免疫印迹...
- [08-15]NiAgarose His标签蛋白纯化试剂盒（包涵体蛋白）品牌：百奥莱博北...
- [10-03]问个,一抗二抗结合的问题(elisa)_二抗抗鸭_二抗_分子细胞生化试剂_...
- [08-13]【求助】DNA甲基化纯化试剂盒的购买 实验方法
- [07-20]检测血清中幽门螺旋杆菌抗体含量的试剂盒及其使用方法技术_技高网
精选品牌
热卖商品
非肌肉肌动蛋白的纯化实验一非肌肉肌动蛋白的纯化
蚂蚁淘
/发布时间:1632072607 /浏览量:93
================ 蚂蚁淘在线 ================
免责声明：本文仅代表作者个人观点，与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实，对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺，请读者仅作参考，并请自行核实相关内容
版权声明：未经蚂蚁淘在线授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的，应该授权范围内使用，并注明“来源：蚂蚁淘在线”。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。
相关阅读
-
资质认证
获得国家资质，权威认证！
-
全国联保
全国联保，官方无忧售后
-
正规发票
正规发票，放心购买
-
签订合同
签订合同，保障您的权益
| 实验材料 | 非肌肉肌动蛋白 |
|---|---|
| 试剂、试剂盒 | DNA酶Ⅰ缓冲液 |
| 仪器、耗材 | DEAE柱 |
| 实验步骤 | 1.准备贮存液和材料。 2xDNA酶Ⅰ缓冲液： 20mmol/LTris-HCl，pH8.0 1mmol/LDTT 0.4mmol/LCaCI2 0.4mmol/LATP 抑蛋白酶肽 抑蛋白酶 亮抑蛋白酶肽 抑胃酶肽A PMSF TPCK 50%甲醛在DNA酶柱缓冲液中 0.4mol/LNH4CI在DNA酶Ⅰ缓冲液中 0.3mol/LKCl在DNA酶Ⅰ缓冲液中 DNA酶Ⅰ柱缓冲液 2.准备一个5~10ml的DNA酶Ⅰ的亲和柱。 3.准备一个0.2~1ml的DEAE柱：用DNA酶Ⅰ缓冲液平衡的DEAE-纤维素。 4.通过离心收集细胞并用等渗盐溶液（例如PBS)洗去培养液。 5.在加蛋白酶抑制剂的DNA酶柱缓冲液中重悬细胞沉淀物。 6.用对于感兴趣细胞的标准方法进行细胞匀浆。 7.用相差显微镜证实超过99%的细胞已经裂解了。 8.100000g离心裂解物45分钟。 9.用巴斯德吸管转移上清，避免混入脂肪。 10.柱子上样： (1)上清和用DNA酶Ⅰ缓冲液加蛋白酶抑制剂平衡了的DNA酶Ⅰ亲和介质混合，并把介质/蛋白混合物倒到一个小杆子中。 (2)在装填柱子时收集流出液，通过用抗肌动蛋白抗体进行的免疫印迹、DNA酶Ⅰ抑制分析或SDS-PAGE来证实有大量肌动蛋白留在柱子中。 11.用2倍体积含蛋白酶抑制剂的DNA酶柱缓冲液洗柱子，然后用含蛋白酶抑制剂和0.4mol/LNH4Cl的DNA酶柱缓冲液洗柱子。 12.用含50%甲醛的DNA酶Ⅰ柱缓冲液洗脱肌动蛋白。 13.立即把50%甲醛洗脱液上样到0.2~1mlDEAE柱子上。 14.用5倍体积的DNA酶Ⅰ柱缓冲液洗DEAE柱，然后用含0.3mol/LKCl的DNA酶Ⅰ柱缓冲液洗脱。分部收集，每管200μl。 15.检测收集液的蛋白浓度，然后混合出峰时的收集液。 16.加MgCl2使浓度为2mmol/L(这是选用于天然肌动蛋白），以使肌动蛋白聚合，用SDS-PAGE分析多肽组成。 产量应该是5%左右，所以从湿重10g的细胞指望得到2.5~5mg纯化了的肌动蛋白是合理的。 |
| 在线客服咨询 | ||||
| 您好请问有什么可以帮您的？ | ||||
| 取消 | 点击对话 | |||
非常满意