相关文章
促销商品
最新问答
- [09-30]海南大学食品学院热带探索.doc
- [10-19]求助超声波破碎细菌细胞的方法,条件?
- [07-22]转化子DNA的快速鉴定 实验方法
- [07-24]一种大肠杆菌的破碎方法
- [09-30]遗传学实验教学中动物基因组dna提取方法研究李聪聪.docx资源下载...
- [09-30]如何除去破碎后的细胞中的生物大分子黄页88移动版
- [07-20]冻融法破碎细胞的冻融时间与破碎程度有无关联_问答详情_破碎混匀...
- [12-04]【求助】[求助] 溶菌酶破碎大肠杆菌 蛋白质和糖学论坛
- [08-10]一种提取卵黄中抗体的新方法
精选品牌
热卖商品
我做大肠杆菌原核表达，选用pGEX系列载体，收集菌体超生破碎后离心取菌体上清，上清内有大量核酸，用GST亲和层析柱纯化蛋白，谷胱甘肽洗脱峰特别小。
问：1如才能提高柱子吸附蛋白量？
2样品中的核酸对吸附有无太大影响？
3我拟采用阴离子交换树脂，问pH8.0条件下除去核酸可否？
4怎么提高样品的澄清度？
问：1如才能提高柱子吸附蛋白量？
2样品中的核酸对吸附有无太大影响？
3我拟采用阴离子交换树脂，问pH8.0条件下除去核酸可否？
4怎么提高样品的澄清度？
相关回复
-
已帮助 0人
-
回复：时间：2009-02-19
GST蛋白纯化得率低，我觉得一般问题不会出现核酸什么的上。就我做过的纯化，我觉得有几个注意点：一是蛋白本身，最好不是包含体形式表达，要不然上清中本来蛋白就少。二是结合有两种方式，一是过柱子，二是将微珠和上清在4度混匀一小时，再自填装，效果要好很多很多，吸附更好。三是谷胱甘肽洗脱时，ph特别重要，需要在ph8.0时，谷胱甘肽活性才最好，最后一步最容易忽略，我建议你检查是否谷胱甘肽将蛋白完全洗脱下来了。
-
已帮助 0人
-
已帮助 0人
-
已帮助 0人
相关问题
- 1506741490海南大学食品学院热带探索.doc
- 1098157620求助超声波破碎细菌细胞的方法,条件?
- 1626890401转化子DNA的快速鉴定 实验方法
- 1627063202一种大肠杆菌的破碎方法
- 1506741493遗传学实验教学中动物基因组dna提取方法研究李聪聪.docx资源下载...
- 1506741493如何除去破碎后的细胞中的生物大分子黄页88移动版
- 1626717602冻融法破碎细胞的冻融时间与破碎程度有无关联_问答详情_破碎混匀...
- 1228351980【求助】[求助] 溶菌酶破碎大肠杆菌 蛋白质和糖学论坛
- 1186716840一种提取卵黄中抗体的新方法
- 1213068180【求助】酵母表达——玻璃珠振荡破碎细胞问题 经验共享 分析测试百科...
- 1190947200大肠杆菌超声破碎很久不见澄清仍是白色的 分子生物 学术 ...
- 1175782500酵母细胞破碎方法? 生物科学
