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![academy biomed/[B02] Biotinylated Sheep Anti-Human Apolipoprotein (a)/519](/images/academybiomed/b02_300x300.jpg)
我打算做蛋白提取，以前单纯用超声效果不好，为了尽量保留活性，选择用溶菌酶见超声破碎的方法。
我按照分子克隆上的步骤：
1.菌体称重为0.4g，加PBSbuffer3ml（PH=8.05），充分混匀。
2.加现配的50mg/ml溶菌酶溶液240微升，至终浓度4mg/ml。冰置3小时。
3.超声400w，10s，10s，40次，结果目测还是乳白色，镜检很多菌体。
为什么破不开，搞不懂，我前几天做预实验的时候，还能变澄清？？？
注：预实验的步骤与现在的一样，只是菌体重量是0.1g加PBS3ml，再加溶菌酶至1mg/ml，超声400w，10s,10s,20次。
麻烦大家能给以帮助，先谢谢了...
我按照分子克隆上的步骤：
1.菌体称重为0.4g，加PBSbuffer3ml（PH=8.05），充分混匀。
2.加现配的50mg/ml溶菌酶溶液240微升，至终浓度4mg/ml。冰置3小时。
3.超声400w，10s，10s，40次，结果目测还是乳白色，镜检很多菌体。
为什么破不开，搞不懂，我前几天做预实验的时候，还能变澄清？？？
注：预实验的步骤与现在的一样，只是菌体重量是0.1g加PBS3ml，再加溶菌酶至1mg/ml，超声400w，10s,10s,20次。
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