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骨骼肌卫星细胞纯化及培养的实验研究
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陈从波 姚启盛 王卫民 王晓康 陈立新
摘 要 目的:建立一种骨骼肌卫星细胞纯化及培养方法。方法:取成年雌性 大鼠前肢肱三头肌,用胶原酶
和70’G,’) 进行消化,采用差速贴壁的方法纯化骨骼肌卫星细胞,用含! K 胎牛血清的9,-’8?5 培养基进行培养,
( )
V 骨骼肌肌动蛋白 V ’,A/ -)+A0/ ,/+0: 免疫细胞化学染色进行细胞鉴定。结果:成功地分离培养了成年大白鼠的
骨骼肌卫星细胞。结论:采用差速贴壁的方法可以成功纯化骨骼肌卫星细胞,为将来自体肌卫星细胞移植治疗压力
性尿失禁打下了基础。
关键词 肌,骨骼 细胞,培养的 纯化 大鼠
压力性尿失禁多发生于生育后女性和前列腺术 56 L 骨骼肌卫星细胞的纯化及培养 为减少成纤维
P 5Q
后,严重影响病人的生存质量 治疗压力性尿失禁除 细胞的污染,参照 等 差速贴壁法进行细胞纯化,
% OI
了手术外,尿道周围注射是目前运用较多、效果较好 将细胞悬液置入经鼠尾胶原包被的培养瓶中培养
的方法,常用的注射材料有特氟隆、胶原、硅粒 硅微 ,贴壁的细胞为 ;未贴壁的细胞悬液转入另一
5 R SS 5
粒和硅微球 、生物玻璃等。但这些材料注射治疗远期 培养瓶中培养 ,贴壁的细胞为 ;未贴壁的细胞
! R SS!
效果较差,且有过敏、炎症、注射颗粒远处转移等并发 悬液再转入另一培养瓶中培养 5T R ,贴壁的细胞为
症。随着组织工程学及细胞生物学的迅速发展,人们 SSL ;未贴壁的细胞悬液转入另一培养瓶中培养!H R ,
对骨骼肌卫星细胞 ( )
’()*)+,* -.’/*) ’,+)**0+) /)**’% 贴壁的细胞为SSH 。此过程重复 间隔!H R 至SS# 。然
1213 4 的生物学特性有了进一步的了解。近年来,国外 后用生长培养基进行培养, 后换液,以后每天换液
H F
不少学者采用差速贴壁的方法纯化骨骼肌卫星细胞, 5 次,倒置显微镜下观察细胞形态与生长情况,待细胞
然后注射到尿道周围治疗压力性尿失禁及尿道括约 生长至T K 接触后传代培养。
肌损伤,取得了可喜的效果。成年动物骨骼肌卫星细 骨骼肌卫星细胞生长曲线的绘制 取第 代
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