- [08-02]如何构建重组荧光质粒转染后稳定表达的细胞系
- [07-29]稳转细胞株总是丢,怎么办? 分子生物 综合其他 论坛...
- [10-02]牛奶体细胞超标的危害 美篇
- [07-28]稳转细胞株筛选_价格厂家供应商_北京吉田生物科技有限公司_...
- [10-02](完整版)G418筛选稳定表达细胞系经验总结
- [08-14]某基因shRNA感染稳转细胞株过表达该基因的质粒的问题 核酸基因技术...
- [06-09]稳转细胞系构建问题 细胞技术讨论版论坛
- [10-06]利用CRISPR/Cas9系统构建4T1细胞CXCR4基因敲除稳定细胞株《解...
- [10-02]【求助/交流】pcDNA3.1能做G418筛选,获得稳定转染株吗 分子生物...
相关回复
-
已帮助 0人
-
回复:时间:2017-10-12
基因敲出质粒转染可以构建稳定细胞株一种是脂质体转染后,单克隆筛选稳定细胞株.另外一种是应用逆转录病毒,慢病毒转染,筛选稳定细胞株.脂质体转染:在转染24小时后,消化细胞并计数.将细胞种到96孔板,保证每个孔2-3个细胞,这样才能得到单克隆.待细胞贴壁后,加入抗生素筛选.筛选时间和浓度视细胞而定.一般G418一个星期作用,嘌呤霉素2-3天.脂质体法筛单克隆时间较长,且效率低,大概只有1%.病毒转染:先要用包装细胞,一般为293细胞,包装出病毒,再用病毒转染目的细胞.包装病毒视不同类型的病毒而定,一般要3-5天的时间.包装好的病毒要测滴度,根据滴度决定转染目的细胞的病毒量.转染目的细胞1-2天后加抗生素筛选得到稳定细胞株.病毒转染得到稳定细胞株的效率高,只是步骤繁琐.
- 1627840802如何构建重组荧光质粒转染后稳定表达的细胞系
- 1627495202稳转细胞株总是丢,怎么办? 分子生物 综合其他 论坛...
- 1506913210牛奶体细胞超标的危害 美篇
- 1627408802稳转细胞株筛选_价格厂家供应商_北京吉田生物科技有限公司_...
- 1506913210(完整版)G418筛选稳定表达细胞系经验总结
- 1628877601某基因shRNA感染稳转细胞株过表达该基因的质粒的问题 核酸基因技术...
- 1496976420稳转细胞系构建问题 细胞技术讨论版论坛
- 1507292526利用CRISPR/Cas9系统构建4T1细胞CXCR4基因敲除稳定细胞株《解...
- 1506913210【求助/交流】pcDNA3.1能做G418筛选,获得稳定转染株吗 分子生物...
- 1629396002GFP稳定转染的细胞做免疫荧光,被固定后到最后荧光显微镜下观察时, G...
- 1506913210慢病毒载体构建步骤
- 1626890401如何进行稳转株筛选稳定转染过程.PDF