稳转细胞株

2017-10-02如何利用慢病毒载体构建稳定表达外源基因的细胞系不

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回复:时间:2017-10-07

真核表达载体包括腺病毒载体和慢病毒载体,在真核细胞内用于表达目的蛋白的载体都可以叫做真核载体。 腺病毒载体携带外源基因较大,可瞬时高表达。 慢病毒载体携带外源基因较小些,但可以重组入细胞基因组,稳定高表达。1.将外源基因插入慢病毒载体2.将构建完成的载体与慢病毒包装质粒混合,共转染靶细胞3.收集病毒液4.用病毒液感染靶细胞5.用载体上带的抗生素进行筛选,如果没有,可以用无限稀释法6.获得稳转株