服务名称：

构建稳转细胞株服务

稳转细胞系（稳定表达细胞株）指在细胞中持续稳定表达特定基因或干扰特定基因表达。稳转细胞株的目的基因质粒DNA整合到细胞染色体上，使细胞长期稳定表达该基因。创翼有着多年构建稳转细胞株的经验，已在HEK293,293T,PC12,NIH3T3,B16,GBC-SD,Hela等多个种属细胞中成功构建过表达和RNAi稳转细胞株。
用脂质体转染法或慢病毒侵染的方法将构建好的含靶基因的载体导入细胞，根据不同的基因载体中所含的抗性标志选用相应的药物进行筛选混合阳性克隆。在阳性混合克隆的基础上，得到单细胞长出的阳性单克隆，继而得到稳转转染细胞株。
常用的真核表达载体的抗性标志物有潮霉素（hygromycin）、新霉素（neomycin）和博来霉素（zeocin）。
稳转细胞株构建流程（以脂质体转染为例）

产品特点：
1. 稳定：保证15代以内稳定转染细胞稳定表达。
2. 迅速：一般控制在2个月以内完成构建。
3. 经济：价格实惠，性价比高。
4. 质量保证：对外源基因进行严格鉴定。
客户提供：
1. 构建好的外源基因载体
2. 待转染的细胞株。
实例：
转染效果图：

 

目录号	产品名称	价格	周期	备注
S0001	基因过量表达稳转细胞株	￥7500	7-9周	保证10代以内稳定
S0002	RNAi稳转细胞株	￥7500	7-9周
S0003	miRNA稳转细胞株	￥7500	7-9周

参考文献：
1.      DannyRangasamy,DavidJTremethick&IanKGreaves:Geneknockdownbyecdysone-basedinducibleRNAiinstablemammaliancelllines.NatureProtocols3,-79-88(2008)
2.      KeisukeKaji,KatherineNorrby,AgnieszkaPaca,MariaMileikovsky,PariaMohseni&KnutWoltjen:Virus-freeinductionofpluripotencyandsubsequentexcisionofreprogrammingfactors.Nature458,771-775(9April2009)
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