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Xgal staining of embryos
蚂蚁淘
/发布时间:1629912604 /浏览量:222
X-galstainingofembryos
ProtocolsuppliedbyS.P.Yee(spyee@julian.uwo.ca)andJoeChan(cchan@hgmp.mrc.ac.uk).
Procedure
- DissectembryosinPBS
- Immediatelytransfertheembryostofixativeat4oC,incubateindarkfor1hour.
- Rinsetheembryoswithrinsebufferatroomtemperature3x15minutes.
- Incubateindarkwithstainingbufferat37oC3-7hoursorovernight.
Materials
- 10%NP40
- 1%Deoxycholate(0.5MEGTA(make1Manddilutewith4MNaOHtilldissolves.CheckpH=neutral,makeupvolumefor0.5M)
- 0.5MK3Fe(CN)6=1.65g/10ml(red)
- 0.5MK4Fe(CN)6=2.10g/10ml(yellow)
- 40mg/mlX-gal(indimethylformamide)
- 1MMgC12
1.Fixative
- 4%ParaformaldehydeinPBS
2.RinsebufferFinalconcentrationStock
- 5mMEGTA2.0ml
- 0.01%Deoxycholate2.0ml
- 0.02%NP400.4ml
- 2mMMgCl20.4ml
- Makeupto200mlwithPBS
3.StainingbufferFinalconcentrationStock
- 5mMK3Fe(CN)60.4ml
- 5mMK4Fe(CN)60.4ml
- 5mMEGTA0.4ml
- 0.01%Deoxycholate0.4ml
- 0.02%NP4080祃
- 2mMMgC1280祃
- makeupto39mlwithPBS
- add1mlofstockX-galsolutiontomakeupthefinalconcentrationof1mg/ml
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