pricells-原代细胞分离试剂盒ii

分离试剂盒编号：iso-ii分离试剂盒适用：各种人和哺乳动物组织的骨骼肌细胞、平滑肌细胞、心肌细胞、肺组织细胞、软骨细胞及滑膜细胞的分离。分离试剂盒规格：1分离试剂盒价格：￥1980分离试剂盒产地：中国，pricells分离试剂盒特征：不含有hiv、hbv、hcv、细菌、支原体、真菌、酵母；不含有内毒素；不含有苯；不含有血清。生物安全级：1级。运输条件：4 oc。储存条件：4 oc，避光。用途范围：只可用于科研。原代细胞分离试剂盒ii 产品说明书一、主要适用骨骼肌细胞、平滑肌细胞、心肌细胞、肺组织细胞、软骨细胞及滑膜细胞。二、试剂盒组成1、buffer a： 100ml × 2 4℃ 保存2、buffer b： 50ml × 2 4℃ 保存3、buffer c 50ml × 1 4℃ 保存4、buffer d： 20ml × 1 4℃ 保存5、buffer e： 20ml × 1 4℃ 保存6、消化液i： 2ml × 2 4℃ 保存7、消化液ii: 2ml × 1 4℃ 保存三、使用方法注意： 使用前请认真阅读说明书，按说明书的要求对试剂进行妥善保存。本试剂盒供用于5次组织的原代细胞分离，每次分离的组织约1g。取消化液i 放入50ml buffer b中，放4℃保存。用完后，再新鲜配制。消化液ii放入50ml buffer c中，放4℃保存。1、取组织重约1g，放入无菌培养皿中，取1 × pbs（ph7.4）清洗组织，充分去除组织表面的血渍和其它异物。2、将组织转入另一无菌的培养皿，切去多余组织如脂肪或坏死组织，用无菌刀 将组织切成1mm 3小块。3、用无菌弯头镊将组织块转入50ml的无菌离心管中，让组织块沉淀，吸去多余液体，加入10ml buffer a，充分混匀，300g离心5分钟，弃上清，如此重复操作3次。4、用10ml buffer b重悬组织块，将组织块悬液转移至25cm 2无菌培养瓶中， 放置co 2培养箱中，37℃培养24小时。5用强力吹打使组织分散，将悬液移入15ml无菌离心管，500g离心5分钟， 弃上清。6、取10ml buffer c 悬浮组织块，置于37℃水浴中30分钟，每10分钟摇动一次，让组织块沉淀。7、取上清放入50ml离心管中，加入1ml buffer d, 终止反应。8、重复步骤6、7两次。9、将吸出全部上清进行离心，500g离心5分钟，弃上清。10、取2ml buffer e悬浮细胞，用血球计数板或电子记数仪计数细胞，并检测细胞活性。11、悬浮细胞用相应的原代细胞培养基稀释，使每毫升培养基中含有1×10 6个细胞，接种培养瓶中，大约每平方厘米2×10 5个细胞。12、每隔2-4天更换一次培养基（以ph变化为标准），观察细胞生长情况。

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