- genaxxon供求商机
- 【讨论】conA和LPS同时刺激脾细胞,为什么细胞增殖会明显...
- GB/T 13542009 大米_国家标准_国内标准_食品标...
- 人雪旺细胞性能参数,报价/价格,图片
- 不同类型人正常原代细胞库_原代细胞及培养基
- 一种CRISPRCas9介导的拟南芥高效基因编辑系统的构建与...
- 高场磁共振显示的中性静脉征或可特异诊断多发性硬化
- 靳健教授与中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所朱玉长副研究...
- SIAD Macchine Impianti S.p.A
- 医学免疫学实验课件溶血实验
- 人生发基质细胞HHGMC
- App Store 上的“AJF American Jun...
- [10-06]细胞生物学实验小鼠肝细胞原代培养
- [08-10]基因的区别基因突变和基因变异有什么区别
- [08-01]传代细胞和原代细胞的克隆难易为什么说用传代细胞
- [07-31]知识分享:细胞转染原理及常见转染方法的比较 分析行业新闻
- [08-06]原代培养心肌细胞学术百科知网空间
- [08-08]【求助】裸鼠成瘤试验收集细胞、接种操作 实验动物
- [08-02]原代细胞培养步骤
- [07-30]原代细胞培养取材过程中使用DNA酶 细胞技术讨论版论坛
- [07-26]原代细胞培养实验室常规步骤
相关回复
-
已帮助 0人
-
回复:时间:2017-10-03
原理 将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培 养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。操作步骤 (一)胰酶消化法 1、器材:将孕鼠或新生小鼠拉颈椎致死,置75%酒精泡2—3秒钟(时间不能过长、以免酒精从口和肛门浸入体内)再用碘酒消毒腹部,取胎鼠带 入超净台内(或将新生小鼠在超净台内)解剖取肝脏,置平皿中。 2、用Hank’s液洗涤三次,并剔除脂肪,结缔组织,血液等杂物。3、用手术剪将肝脏剪成小块(1mm2),再用Hank’s液洗三次,转移至小青霉素瓶中。 4、视组织块量加入5—6倍的0.25%胰酶液,37℃中消化20—40分钟,每隔5分钟振荡一次,或用吸管吹打一次,使细胞分离。5、加入3—5ml培养液以终止胰酶消化作用(或加入胰酶抑制剂)。 6、静置5—10分钟,使未分散的组织块下沉,取悬液加入到离心管中。7、1000rpm,离心10分钟,弃上清液。 8、加入Hank’s液5ml,冲散细胞,再离心一次,弃上清液。 9、加入培养液l—2 ml(视细胞量),血球计数板计数。10、将细胞调整到5×105/ml左右,转移至25ml细胞培养瓶中,37℃下培养。 上述消化分离的方法是最基本的方法,在该方法的基础上,可进一步分离不同细胞。细胞分离的方法各实验室不同,所采用的消化酶也不相同(如 胶原酶,透明质酶等)。(二)组织块直接培养法 自上方法第3步后,将组织块转移到培养瓶,贴附与瓶底面。翻转瓶底朝上,将培养液加至瓶中,培养液勿接触组织块。入37℃静置3—5小时,轻 轻翻转培养瓶,使组织浸入培养液中(勿使组织漂起),37℃继续培养。
-
已帮助 0人
- 1507292526细胞生物学实验小鼠肝细胞原代培养
- 1628532002基因的区别基因突变和基因变异有什么区别
- 1627754402传代细胞和原代细胞的克隆难易为什么说用传代细胞
- 1627668002知识分享:细胞转染原理及常见转染方法的比较 分析行业新闻
- 1628186402原代培养心肌细胞学术百科知网空间
- 1628359203【求助】裸鼠成瘤试验收集细胞、接种操作 实验动物
- 1627840802原代细胞培养步骤
- 1627581602原代细胞培养取材过程中使用DNA酶 细胞技术讨论版论坛
- 1627236002原代细胞培养实验室常规步骤
- 1627149603原代细胞培养污染、生长问题分析及解决方案
- 1506913212如何避免细胞培养物的污染.PDF
- 1507292526经验总结:原代细胞分离提取的注意事项