2011-09-08【求助】【【【【新手求助】】】】请问各位站友，我的逆转录试剂盒室温下放了6个小时还能用吗？

呵呵，淡定啊！没事的。RT逆转录试剂盒放在零下20度的原因是：防止反转录酶失活。为什么酶在室温下失活呢？是温度让它失活吗，答案是否定的，因为酶在42度下作用都有活性，所以在室温下不会失活的。之所以放在零下20度的真正原因是防止反转录酶等各种酶染上杂菌，杂菌产生蛋白酶分解酶，从而让酶失活。因此我们是试剂盒通常都冷冻贮存。你偶尔一次放在室温，应该没大问题，不要再犯就好！以后做的时候，把反转录酶和PCR聚合酶放在冰柜里，用的时候从里面加，用完即放回。其他的试剂也应分装。

展开引用hyhyyl呵呵，淡定啊！没事的。RT逆转录试剂盒放在零下20度的原因是：防止反转录酶失活。为什么酶在室温下失活呢？是温度让它失活吗，答案是否定的，因为酶在42度下作用都有活性，所以在室温下不会失活的。之所以放在零下20度的真正原因是防止反转录酶等各种酶染上杂菌，杂菌产生蛋白酶分解酶，从而让酶失活。因此我们是试剂盒通常都冷冻贮存。你偶尔一次放在室温，应该没大问题，不要再犯就好！以后做的时候，把反转录酶和PCR聚合酶放在冰柜里，用的时候从里面加，用完即放回。其他的试剂也应分装。......太感谢了，因为我这个试剂盒还没拆封，应该不会污染吧，一定接受这次的教训，以后要分装好，用完及时放回，希望看到此贴的新手&菜鸟们也要注意啦！谢谢楼上

事实证明，是可以用的，我把逆转录酶的量提高了一倍，最后跑荧光定量PCR结果还是很好的，证明之前逆转录是没问题的！