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白细胞分类计数实验
实验方法原理 | 把血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片,用复合染料染色,根据各类白细胞形态特征予以分类计数,得出相对比值(百分率),经观察数量、形态和质量的变化,对疾病有辅助诊断意义。 | ||||||
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仪器、耗材 | 推玻片一块干净玻片数块消毒针头75%酒精棉球蜡笔擦镜纸显微镜瑞氏染液蒸馏水显微镜油二甲苯
实验步骤 | 一、血涂片制作 1.以75%酒精棉球消毒指头,用消毒针头刺进局部,先拭去第一滴血,然后取血一小滴(米粒大小)置于干净玻片上的一端。 2.用干净推玻片的一端放在血滴前方,将推玻片略向后移,使与血滴相接触,让血滴在推片与载玻片的夹角间平均散开后,用30-45度角不加压力,平稳地推至另一端制成均匀的血膜薄片(见图41)。 3.血片凉干后,滴上瑞氏染液,使盖满整个血膜片,大约半分钟后再加一倍蒸馏水,轻轻摇动玻片,待5-10分钟后,用净水缓缓地冲去玻片上的染液,冲洗时应将玻片持平,使染液自玻片边缘溢出,以免沉淀物附于血膜上影响观察结果辩认。晾干后分类。 二、分类计数 1.把染好凉干的血片,先在低倍镜下观察细胞染色及分布情况,然后用油镜分类,分类时要按一定顺序进行(图42)。 2.将所见到的细胞分别记下,至总数100个为止,计算各类细胞所占的百分数。 参考值 细胞类别 成人 中性粒细胞 杆状核 0.01-0.05(1%-5%) 分叶核 0.50-0.70(50%-70%) 嗜酸性粒细胞 0.005-0.05(0.5%-5%) 嗜碱性粒细胞 0-0.01(0%-1%) 淋巴细胞 0.20-0.40(20%-40%) 单核细胞 0.03-0.08(3%-8%) 注意事项 | 1.要避免重复计数,玻片应由血膜边缘向中央依次上下曲线移动。 2.白细胞总数超过20×109/L,应分类计数200个细胞。白细胞数明显减少的血片,可检查多张血片。 其他 | 临床意义 1.增多 (1)中性粒细胞:急性化脓感染,粒细胞白血病,急性出血,溶血,手术后,尿毒症,酸中毒,急性汞中毒,急性铅中毒等。 (2)嗜酸性粒细胞:变态反应,寄生虫病,某些皮肤病,某些血液病,手术后,烧伤等。 嗜碱性粒细胞:慢性粒细胞白血病,何杰金病,癌转移,铋中毒等。 (3) 淋巴细胞:百日咳,传染性单核细胞增多症,慢性淋巴细胞白血病,麻疹,腮腺炎,结核,传染性肝炎等。 (4)单核细胞:结核,伤寒,亚急性感染性心内膜炎,疟疾,黑热病,单核细胞白血病,急性传染病的恢复期等。 2.减少 (1)中性粒细胞:伤寒,副伤寒,疟疾,流感,化学药物中毒,X线和镭照射,抗癌药物化疗,极度严重感染,再障,粒细胞缺乏等。 (2)嗜酸性粒细胞:伤寒,副伤寒以及应用肾上腺皮质激素后。 (3)淋巴细胞:多见于传染病急性期,放射病,细胞免疫缺陷等.
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