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上海桥星生物

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T4DNALigaseT4噬菌体DNA连接酶

产品编号规格价格
T8400-100100u535.00

说明：T4噬菌体DNA连接酶主要催化两条DNA链上相邻的5磷酸基和3-Qiang基之间形成磷酸二酯键。它的主要用途是连接带匹配粘端的DNA分子，或使平端的双链DNA分子互相连接或与合成接头相连接。也可催化DNA与RNA之间以及少数RNA之间的连接，但不能催化单链DNA之间的连接。

单位定义：0.01Weiss单位的T4DNA连接酶可以在16℃下反应20分钟，连接95％的1gDNA-HindⅢ的分解物。

注意：一个Weiss单位的T4DNA连接酶相当于核酸外切酶测定中的0.2单位或60个粘性末端(NewEnglandBiolabs)

存储缓冲液：10mMTris-HCl(pH7.525℃),50mMKCl，

1mMDTT，0.1mMEDTA和50％glycerol。

10反应缓冲液：300mMTris-HCl(pH7.825℃),

100mMMgCl2，100mMDTT，10mMATP

质量控制：

1活性：大于3Weiss单位/微升。

2蓝白克隆鉴定：12Weiss单位T4DNA连接酶与3g经内切酶酶切产生的5或3粘性末端DNA在4℃下，反应16小时后转化到大肠杆菌JM109培养，白色菌落小于总菌落数的2％；12Weiss单位T4DNA连接酶与3g经内切酶酶切产生的钝性末端DNA在4℃下，反应16小时后转化到大肠杆菌JM109培养，白色菌落小于总菌落数的5％。

3核酸内切酶测定：20Weiss单位酶与1g超螺旋质粒DNA在37℃下反应16小时，DNA的电泳图谱不发生变化。

4单链和双链DNase测定：20Weiss单位酶与50ng同位素标记的单链或双链DNA反应16小时，单链DNA的释放量小于2％，双链DNA的释放量小于1％。

5RNase测定：37℃时，20Weiss单位酶与50ng3H-RNA保温5小时，释放量小于1％。

6蛋白纯度：SDSPAGE检测纯度90％。

储存条件：20℃

FromPromegaM1801S

订货：021-65672052/18221794820（蒋），：

：qiaoxing2013

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