2021-08-19经典的底物耗尽 [病例帖]

最近终于明白了只有在零级反应期，单位时间内的吸光度变化值才与反应速率成正比正常应该是上图这样，吸光度读数点均在零级反应期内当样本中酶的活性超过试剂盒提供的线性范围时，零级反应期非常短，不能有效的完成速率法检测，此为底物耗尽。常见的有三种情况：1、样本中酶的活性远超线性范围，底物几乎是瞬间被耗尽，零级反应期极短，设定的常规吸光度读数点完全不在零级反应期内，即反应界限内的吸光度点数零，此时甚至可能会测出负值（很容易就能发现）；2、样本中酶的活性超过线性范围较多，底物在较短时间内是被耗尽，零级反应期较短，设定的常规吸光度读数点大部分不在零级反应期内，此时会造成结果严重偏低（不易发现，故可能导致严重后果）；如下图，红色区域是读数点，吸光度读数点完全不在零级反应期内3、样本中酶的活性超过线性范围并不多，底物耗尽需要相当的时间，零级反应期相对上述两种情况要长，设定的常规吸光度读数点仅有小部分不在零级反应期内，此时依然会造成结果偏低但没有2那么严重（不易发现，也不会太严重）。不知道我说的对不对？

技术贴，顶！d=====(￣▽￣*)b感觉楼主的两个酶线性范围有点小啊！从楼主后两张图片看来，ALT的线性估计只在两百多些，AST的线性在500左右。谷丙ALT500不到和谷草AST1000左右就不行了，按照说明书给定的各项参数，两者的线性范围一般都在800以上，正常情况下即使在这两个值附近都是可以勉强得出结果的（未设定读点前移或者弹性速率啥的），如果机器的线性范围达不到说明书给定的范围，就要注意仪器参数设定有没有问题或者试剂质量有没有问题。正常情况下，两个酶的参数中样本与试剂体积比都在1:10左右，如果样本用量增大会缩小整个反应的线性范围，好处是低值结果重复性会很好，不利的地方就是遇到特高值标本在没有设定弹性速率时容易漏掉，造成误判。楼主可以先核对试剂说明书与上机参数间有没有较大的出入。

南方雨对了，胆汁酸的结果是多少？要是酶胆分离就更好了酶胆分离，是酶跟胆红素不同步升高，胆红素升高而上述两个酶是真正的处于低值。是在重症肝炎时肝细胞大量坏死，产生或者释放转氨酶的能力完全枯竭，而此时胆红素则直线上升。不是本例中的过高导致的底物耗尽的情况。