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KLH是分子量十分巨大的蛋白,有几百万Da,所以在KLH分子表面有大量的活性基团,最常用于偶联的是伯胺基团。小的多肽通常也带有不同基团可以用于偶联,常用的有伯胺基团,羧基和巯基。多肽与KLH的偶联就是利用这些基团,再通过交联剂(crosslinker),将多肽上的巯基/羧基/伯胺与KLH上的伯胺相连,从而形成共价偶联,制备成完全抗原,用于免疫动物获得抗体。所以偶联的伯胺应该是来自于赖氨酸侧链和N端,而偶联的羧基则来自于天冬氨酸,谷氨酸和C端,巯基则来自于半胱氨酸。至于偶联上去的数量,和加入的肽段,交联剂,KLH的摩尔比例有关。通常一分子KLH上可能会偶联上百个肽段。
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