- Adhesion Molecules on Lymphocy...
- His标签抗体做western需要考虑哪些_技术交流_技术文...
- 服装中teck pack是什么意思啊?_
- 中国生理学会循环专业委员会细胞膜片钳实验技术培训班通知中文....
- 双功能蛋白交联剂EMCS,55750635_制药网
- 一图读懂:抗生素分类
- Ushanti Colour Chem(USHN)股票最新价...
- 利用CRISPR/Cas9系统大片段敲除绵羊MSTN基因的方...
- Alexa Fluor™ 488 链霉亲和素偶联物
- BasicMechanismsofSUMOylation
- 【求助】有谁能推荐一个价钱合理效果还行的HRP抗原标记试剂盒...
- 功能性交联剂 功能性交联剂批发价格、市场报价、厂家供应.....
- [08-14]甲苯二异氰酸酯对人体的危害?
- [02-08]化学物质与蛋白质的相互作用总结
- [02-03]如何提高胶粘剂的耐水性
- [07-30]DNA蛋白质交联的研究进展
- [08-13]求助:白蛋白与抗体的交联 蛋白质和糖学论坛
- [08-12]蛋白质交联剂有哪些?包括他们的性质。
- [07-20]—[转载]抗原多肽交联中常见都有哪些问题 王达
- [07-28]聚丙烯酰胺胶体出现老化的原因有哪些?技术文章河南海韵环保科技...
- [03-26]郑州市昊锐旗电子科技有限公司
SDSPAGE凝胶电泳常用知识介绍
一、电泳分类
根据缓冲体系和凝胶孔径的不同,可以分为连续电泳和不连续电泳;根据样品的处理方式的不同,又可以分为变性SDS-PAGE及活性SDS-PAGE电泳,以及带有烷基化作用的还原SDS电泳;根据电泳的形式,又可以分为圆盘电泳,水平电泳,垂直电泳及平板电泳。
目前实验室常用的为不连续的变性的还原SDS-PAGE垂直电泳。
二、垂直电泳装备

三、不连续电泳
用浓缩胶(上层胶)和分离胶(下层胶)两种不同浓度,不同PH值的凝胶灌制凝胶板,通过电荷效应,浓缩效应及分子筛效应,达到蛋白质高分辨率的分离。

四、样品及各成分作用介绍
1、样品缓冲液里应包含以下部分:
SDS(十二烷基磺酸钠)
Β-巯基乙醇(BME)
溴酚蓝
丙三醇
Tris-Glycine(PH=6.8)
2、SDS作用
断裂分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质的二级和三级结构,与蛋白质于一定比例结合,从而使蛋白质带上负电荷并具有相同的质合比,在电泳时迁移速率仅与分子量有关。

3、Β-巯基乙醇
阻止半胱氨酸氧化并打开二硫键

4、溴酚蓝和丙三醇
溴酚蓝是一种染料,能够与蛋白质结合显示蛋白质的运动轨迹
丙三醇的密度比水大,能够使样品沉淀到加样槽底部。
5、PAGE胶:
丙烯酰胺(Acr):形成聚合物链
甲叉双丙烯酰胺(Bis):交联剂,形成纵向桥架
过硫酸铵(AP):引发剂,产生自由基
TEMED:催化过硫酸铵产生自由基,加速聚合。


五、检测:考马斯亮蓝染色和银染色
1、考马斯亮蓝染色R-250
红蓝色,每个分子含有两个SO3H,偏酸性,结合在蛋白质的碱基集团上。

2、银染色
机制:将蛋白带上的硝酸银(银离子)还原成金属银,使银颗粒沉积在蛋白带上。
================ 蚂蚁淘在线 ================
免责声明:本文仅代表作者个人观点,与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实,对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺,请读者仅作参考,并请自行核实相关内容
版权声明:未经蚂蚁淘在线授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的,应该授权范围内使用,并注明“来源:蚂蚁淘在线”。违反上述声明者,本网将追究其相关法律责任。

