- 幽门螺旋菌会自愈吗 幽门螺杆菌的症状有哪些
- 双功能蛋白交联剂EMCS,55750635_制药网
- 三臂式功能化学交联剂/蛋白功能化胶体晶体水凝胶微球/...
- His标签抗体做western需要考虑哪些_技术交流_技术文...
- 水溶N3NHS水溶叠氮琥珀酰亚胺酯交联剂_Azide Rea...
- Adhesion Molecules on Lymphocy...
- Ushanti Colour Chem(USHN)股票最新价...
- 功能性交联剂 功能性交联剂批发价格、市场报价、厂家供应.....
- 人脂联素(ADP)ELISA试剂盒 仪器交易网
- PI3KAkt Signaling Pathway | Si...
- 一图读懂:抗生素分类
- 用于逆转肿瘤多药耐药的纳米药物载体的研究_知网百科
- [07-26]【求助】聚合交联剂的选择 高分子 高分子化学论坛学术...
- [08-08]elisa在兽药残留检测中的应用 上海精睿生物科技发展有限公司下载_...
- [08-11]蛋白质N末端组学研究进展
- [02-06]油脂、糖类、蛋白质都属于天然高分子化合物( )——青夏教育精英...
- [07-25]COIP实验常见问题解析_CoIP_分子间相互作用_德泰生物
- [08-06]有机锆交联剂的制备及其性能
- [08-04]什么牌子的全自动洗板机好_Thermo洗板_上海旦鼎国际贸易有限公司
- [10-11]一种胶原蛋白凝胶及其制备方法
- [07-29]crosslinking protein (交联蛋白)
SDSPAGE凝胶电泳常用知识介绍
一、电泳分类
根据缓冲体系和凝胶孔径的不同,可以分为连续电泳和不连续电泳;根据样品的处理方式的不同,又可以分为变性SDS-PAGE及活性SDS-PAGE电泳,以及带有烷基化作用的还原SDS电泳;根据电泳的形式,又可以分为圆盘电泳,水平电泳,垂直电泳及平板电泳。
目前实验室常用的为不连续的变性的还原SDS-PAGE垂直电泳。
二、垂直电泳装备

三、不连续电泳
用浓缩胶(上层胶)和分离胶(下层胶)两种不同浓度,不同PH值的凝胶灌制凝胶板,通过电荷效应,浓缩效应及分子筛效应,达到蛋白质高分辨率的分离。

四、样品及各成分作用介绍
1、样品缓冲液里应包含以下部分:
SDS(十二烷基磺酸钠)
Β-巯基乙醇(BME)
溴酚蓝
丙三醇
Tris-Glycine(PH=6.8)
2、SDS作用
断裂分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质的二级和三级结构,与蛋白质于一定比例结合,从而使蛋白质带上负电荷并具有相同的质合比,在电泳时迁移速率仅与分子量有关。

3、Β-巯基乙醇
阻止半胱氨酸氧化并打开二硫键

4、溴酚蓝和丙三醇
溴酚蓝是一种染料,能够与蛋白质结合显示蛋白质的运动轨迹
丙三醇的密度比水大,能够使样品沉淀到加样槽底部。
5、PAGE胶:
丙烯酰胺(Acr):形成聚合物链
甲叉双丙烯酰胺(Bis):交联剂,形成纵向桥架
过硫酸铵(AP):引发剂,产生自由基
TEMED:催化过硫酸铵产生自由基,加速聚合。


五、检测:考马斯亮蓝染色和银染色
1、考马斯亮蓝染色R-250
红蓝色,每个分子含有两个SO3H,偏酸性,结合在蛋白质的碱基集团上。

2、银染色
机制:将蛋白带上的硝酸银(银离子)还原成金属银,使银颗粒沉积在蛋白带上。
================ 蚂蚁淘在线 ================
免责声明:本文仅代表作者个人观点,与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实,对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺,请读者仅作参考,并请自行核实相关内容
版权声明:未经蚂蚁淘在线授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的,应该授权范围内使用,并注明“来源:蚂蚁淘在线”。违反上述声明者,本网将追究其相关法律责任。

