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多聚螯合物酶组化实验一UIP 法
蚂蚁淘
/发布时间:1533494015 /浏览量:74
| 实验方法原理 | UIP（universalimmuno-enzymepolymer）法，即通用免疫酶复合物法，是Nichirei发明的一种新型免疫组化染色方法。其基本原理及工作流程与EnVision法相似，不同的是UIP复合物为HRF氨基酸-抗鼠或抗兔IgG复合物（N-Histofine复合物）。因N-Histofine复合物相对分子质量较EnVision复合物相对分子质量稍小，理论上具有更强的穿透力。 | ||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 实验材料 | 石蜡切片 试剂、试剂盒 | 蛋白酶PBSH2O2树胶二甲苯乙醇特异性一抗N-Histofine复合物 仪器、耗材 | 滴管玻片
实验步骤 | 1.4μm常规石蜡切片经烤片后，常规二甲苯、乙醇脱蜡至水，PBS洗3min×3次。 2.预处理组织切片（可用酶消化或AR或不作任何处理，依一抗质量而定）。 3.PBS洗3min×3次。 4.0.3％H2O2阻断内源性过氧化物酶15min，PBS洗3min×3次。 5.适当稀释特异性一抗，37℃孵育1h，PBS洗3min×3次。 6.N-Histofine复合物（HRF氨基酸-抗鼠或抗兔IgG复合物）孵育30min，PBS洗3min×3次。 7.水洗，复染，常规树胶封片。 8.结果观察。 注意事项 | UIP法缺点是多聚物中有N末端暴露，形成的电荷能和组织细胞发生静电吸附，可造成非特异性染色，染色时需平衡静电荷。 其他 |
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