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农杆菌介导的小麦新鲜离体幼胚的转化实验一根癌农杆菌菌液的准备
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实验材料 | 农杆菌细胞 |
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试剂、试剂盒 | 根癌农杆菌甘油原液抗生素 |
仪器、耗材 | MGL液体培养基 |
实验步骤 | 1.从根癌农杆菌甘油原液中吸取400μl加入含10mlMG/L液体培养基并添加相应抗生素的50ml无菌管中,28℃、250r/min摇床振荡培养过夜(17~20h)至OD600nm=1.0~1.5。 2.农杆菌细胞在4500g下离心10min后,弃上清(见注4),用4ml的1X侵染培养基重悬农杆菌细胞。 ![]() ![]() 3.将重悬后含农杆菌的侵染培养基置于50ml无菌管中,28°C黑暗条件下摇床中振荡培养1~3h(见注5)。 |