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过硫酸铜和镨铷滤光片吸收曲线的制作和分光光度计721波长的校正实验
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实验方法原理 | 镨铷滤光片在可见光区域最大吸收峰为529nm,利用这个特性校正721分光光度计 |
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试剂、试剂盒 | |
仪器、耗材 | 721分光光度计镨铷滤光片坐标纸烧瓶吸管 |
实验步骤 | 一、校正 1.预热仪器 2.置波长580nm处,T%调至最大,用一白纸条观察是否有光强均匀的光斑在吸收池处出现,调节光源灯泡使用其符合要求. 3.把灵敏度钮置于最低端,波长度盘置529nm处,反复调节透光度和100%直至稳定,将镨铷滤光片插入光路,仔细旋转波长度盘,找到T值最低点,此时波长应为529nm(λm) 4.计算波长误差:Δλ=λ-λm 5.校正:调波长于529nm处,取出镨铷滤光片,调节T值至于100%处,再插入镨铷滤光片,打开盖板,调节波长校正螺丝,使值最低.波长校正步骤反复检查波长误差,直至符合要求。 二、重复性检查 1.用蒸馏水作空白将波长度盘固定在先690nm,调节透光度为100%. 2.连续测量五次硫酸铜标准液(31.35mol/L即2000ug/ml),分别记录 透光度值。 3.计算:Δl=lmax-lmin。 Lmax.lmin分别为透光度最大值和最小值,一般要求Δl小于0.5% 三、吸收曲线制作 1.连续测定五个不同浓度的蛋白标准液,记录其吸光度值. 2.分别以浓度为横坐标.吸光度为纵坐标绘制吸收曲线. |
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