2018-01-23抗体蛋白质纯化的好方法

抗体纯化分了几种类型，根据用途决定选择哪种方法进行纯化：1. 粗纯：将制备抗体的血清或是腹水，细胞上清，直接用盐析法进行处理，这样可以将这些物质里面的其他杂质去掉，获得蛋白的成分，但是由于是粗纯，里面会混有大量的其他蛋白，这样获得的抗体，纯度较低，用于实验中背景比较高。2.通用型纯化：用抗体结合蛋白Protein A，Protein G或者Protein L。因为不同来源的抗体和这些抗体结合蛋白的结合能力不同，所以需要根据抗体来源选择使用哪种抗体将诶和蛋白最好。对于有一些单链抗体，则多半使用protein L来进行纯化。经过抗体结合蛋白的亲和纯化后，溶液中基本只保留了抗体的成分，其他蛋白都去掉了，抗体纯度可以比较高。相对来说，这种方法是大规模抗体制备中，用得最多的纯化方法，很多抗体公司都采用这种方法来对抗体进行纯化。3.特异型纯化：但是有些抗体，需要纯度特别高，特异性特别好，就不能简单采用上述两种方法进行纯化了。必须要通过将抗原固定制备成特异的亲和纯化柱，再纯化抗体。这个时候得到的就全是针对一种抗原的抗体了，特异性最好。当然，由于牵涉到抗原固定等操作，成本相应是最高的。

目前抗体纯化分3个步骤1、捕获：通常用ProteinA或G，成本比较高，目前PALL公司有一款MEP的填料，可以替换ProteinA或G，价格只有ProteinA的八分之一，国内已经有抗体公司在使用这款填料做生产，特别推荐。2、离子交换：各个牌子性能都差不多3、去除多聚体等：GE、Bio-Rad的CHT、PALL的混合模式填料都可以，我有这几个牌子填料去除多聚体的报告，有需要写邮件给我，89347157@qq.com

带有抗原的柱子

可以使用上海生工的SF024-NHS与抗原绞链后，纯化抗体