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2021-07-30【求助】请教战友：检测一个明确的多态性位点能不能只测序，不做酶切

yaobiye
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我的实验中，为了检测一个明确报道的多态性位点（该位点为酶切位点）在细胞中的多态性状态，能不能用高保真酶扩增含该位点的一段序列后，直接测序？还是应该先做酶切，在测序？测序是需要做一个t载体克隆不？

期待着高手们的指点，谢谢。
*请输入10-500个字符

相关回复

已帮助 0人

回复：时间：2021-08-04

直接提取dna pcr扩增后测序就行

有用（0）

已帮助 0人

回复：时间：2021-08-06

还想请教一下，如果只测序的话会不会出现那个位点的多态性暴露不充分，也就是说会不会出现没有检测到的情况？谢谢。期待着您的指点！

有用（0）

已帮助 0人

回复：时间：2021-08-05

如果能够酶切的当然就酶切了，除非你样本量很少，就一两个，样本多的话酶切成本比测序少得多，酶切的准确性不比测序差。测序只需要扩增出片段来就可以了，不用做克隆。的确有可能出现测序有些snp不能检出的情况，但是这种情况不常见

有用（0）

已帮助 0人

回复：时间：2021-08-07

谢谢指教，呵呵。

有用（0）

已帮助 0人

回复：时间：2021-08-01

测序是SNP检测的金标准！

有用（0）

已帮助 0人

回复：时间：2021-08-05

明白了，我也正在准备做相关的SNP试验，顺便请教一下，如果用酶切的话，那个内切酶怎么购买，一般买哪个公司的？

有用（0）

已帮助 0人

回复：时间：2021-08-04

我们这一般用NEB的，找当地的代理公司。

有用（0）

已帮助 0人

回复：时间：2021-07-30

明白了，谢谢指教！

有用（0）
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