转染试剂

  • 293专用转染试剂优惠促销

    产品介绍:

    HG-Trans293TMtransfectionreagent是最新研发的基于纳米颗粒技术为基础的适用于HEK293HEK293T等各种人胚肾293细胞高效转染的一款核酸转染试剂。由于采用纳米技术为依托,可以使核酸转染HEK293细胞的成功率达到95%以上。并且对细胞毒性较小,细胞的存活率得到了很大提升。

    转染提示:

    1.建议用无血清培养基稀释转染试剂和核酸。

    2.转染过程中,培养基不可加抗生素,抗生素的添加会影响细胞的转染效率和毒性。

    3.HG-Trans293TMtransfectionreagent极大的简化了转染过程,转染试剂可直接加入混合好的质粒稀释液,无需分别进行稀释。混合好的核酸-转染试剂复合物合静置后可直接加入含血清的细胞培养集中进行转染

    产品规格:

    货号

    名称

    规格

    TG-10014-1

     HG-Trans293TMtransfectionreagent

    0.5ml

    TG-10014-2

    HG-Trans293TMtransfectionreagent

    1ml

    保存条件:

    4(切勿冷冻);有效期12个月。

    实验步骤

    转染前

    转染前提前一天将合适比例的HEK293细胞接种于细胞培养板中(详细接种量见附录:表二),以第二天转染时,细胞密度达到70%90%汇合度为宜。

    1.DNA转染过程(以24孔板为例)

    a.0.4μgDNA50μl的无血清培养基稀释,并混合均匀。(无血清培养基可选择OPTI-MEM或无血清DMEM)

    b.吸取1.0μlHG-Trans293TMtransfectionreagent加入步骤a混合好的DNA稀释液中,混合均匀,室温静置30min。核酸-转染试剂复合物制备完成。

    备注:

    c.将制备好的核酸-转染试剂复合物加入到含细胞和完全培养基的培养孔中,水平方向上下左右轻轻晃动培养板,使其混合均匀。(本转染试剂适用于含血清的完全培养基,可有助于提高细胞的转染效率和存活率)

    d.放置37细胞培养箱培养,4-6h换液,然后继续培养18~48h后荧光显微镜下检测转染效率。

    2.siRNA转染过程

    siRNA的转染过程遵循上面DNA的转染过程。

    附录:

    表一:DNAsiRNA在不同细胞培养容器中的转染用量

    细胞培养容器

    表面积(cm2)

    DNA转染

    siRNA转染

    核酸转染试剂混合稀释液总体积(每孔)

    培养基总体积(每孔)

    DNA

    HG_TransGene

    siRNA转染

    HG_TransGene

    96-well

    0.3

    0.1μg

    0.25μl

    5pmol

    0.25μl

    25μl

    100μl

    24-well

    2

    0.4μg

    1.0μl

    20pmol

    1.0μl

    50μl

    500μl

    12-well

    4

    0.8μg

    2.0μl

    40pmol

    2.0μl

    100μl

    1ml

    6-well

    10

    2μg

    5.0μl

    100pmol

    5.0μl

    250μl

    2ml

    60-mm/T25flask

    20

    4μg

    10μl

    200pmol

    10μl

    0.5ml

    4ml

    100-mm/T75flask

    60

    12μg

    30μl

    600pmol

    30μl

    1.5ml

    12ml

    表二:不同培养容器中的细胞接种量

    细胞培养板

    96-well

    24-well

    6-well

    表面积(cm2)

    0.3

    2

    10

    HEK293HEK293T细胞接种量

    14×104

    0.52×105

    0.251×106

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