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PepMute™体外siRNA转染试剂 进口转染试剂

mayitao  /发布时间:1488531392 /浏览量:245   

  • 货号：SL100566
    供应商：上海经科化学科技有限公司
    英文名：PepMute™siRNATransfectionReagent
    保存条件：RT/见说明书
    数量：大量现货
    CAS号：无
    规格：1.0ml
    美国Signagen转染试剂
    货号SL100566

     

    PepMute™体外siRNA转染试剂



    产品简介：
    PepMute™体外siRNA转染试剂，是模拟病毒细胞穿膜肽配制的一种全新siRNA载体工具。在各种哺乳细胞中，在浓度只有1nMsiRNA它却能提供超过95%以上的沉默效率。运用我们专有的肽模拟合成技术，数以百计的病毒细胞穿膜肽被模拟、合成、筛选出来，并作为基因载体用在各种哺乳动物的细胞系中（图1）。PepMute™试剂作为一种非常有效的载体经过鉴定和验证，它能聚集和转染短（小于100bp）、单链或双链核苷酸如siRNA，miRNA模拟物和单链DNA，且被广泛用于哺乳动物细胞系中。



    Figure1.AcartoonshowingPepMute™siRNATransfectionReagentwasdevelopedbyPST

    产品规格：
    -PepMute™试剂，1.0ml，转染0.5~5pmolessiRNA或miRNA模拟物，能在24孔板中足够完成1333次反应。
    -    PepMute™转染缓冲液（5X)，与PepMute™试剂配合使用以获得转染效率最大化，8.0ml（5x)浓缩原液下能制成40ml的工作液。

    应用：
    -siRNA,miRNA模拟物或mRNA转染
    -DNA/siRNA共转染
    -单链DNA转染

    储存条件：
    40C储存。若储存合适，产品的稳定性能保持12个月以上。

    特点：
    -    在最终浓度为1.0nMsiRNA也能保持非常出色的沉默效应。
    -使用在各种各样的细胞系中，超过95%的有基因沉默效应。
    -单管反应，简单、标准的操作程序。
    -与血清和抗生素兼容。
    -适用于高通量筛选。
    -细胞毒性低。
    -价格实惠，物美价廉。

    SilencingEfficacyComparisonbetweenPepMute™siRNATransfectionReagentandLeadingProducts

    Figure2.ExcellentsilencingofendogenouslyexpressedKIF11(alsoknownasEG5)inHEK293cellswith1.0µlofPepMu    te™reagentand0.5pmolEG5siRNAperwellof24-wellplate.KIF11(alsoknownasEG5)encodesamotorproteinthatbelongstothekinesin-likeproteinfamilyinvolvedinchromosomepositioningandbipolarspindleformationduringcellmitosis.AreductioninKIF11levelscausesmitoticarrest.PepMute™reagenteffectivelydeliversEG5siRNA(final1.0nM)toHEK293cells,leadingtomorethan80%of"round-up"phenotypeofHEK293cells48hposttransfectionovernegativecontrol(final1.0nMwithshamEG5siRNA)whileleadingsiRNAtransfectinreagents,Lipofectamine™RNAiMAX(RNAiMAX,1.0nMEG5siRNA)/INTERFERin(1.0nMEG5siRNA)/Dharmafect(10.0nMEG5siRNA)andjetPRIME(20nMEG5siRNA)giveaverage37%,23%,53%and48%ball-shapedphenotyperespectivelyonHEK293cells.Thephenotypeof"rounded-up"293cellswerevisualized(upperpanel)andquantified(lowerpanel)48hposttransfectionwithaNikonmicroscope.


    Figure3.SilencingefficiencycomparisonofPepMute™TransfectionReagent(upperpanel)withDharmafect4(middlepanel)andLipofectamine™RNAiMAX(RNAiMAX,lowerpanel)siRNATransfectionReagentsonA549cells.    siRNAtargetingrenillaluciferaseatdifferentfinalconcentrationsrangingfrom0.5to20nMwasco-transfectedwithrenillaluciferasegene(0.5µgofpRL-CMVDNAperwell)bytheabovethreetransfectionreagentspermanufacturers"protocolsintoA549cellsgrowingona24-wellplate.Renillaluciferaseactivitywasdetermined36hafterpostco-transfectionwithrenillaluciferasedeterminationsystem(Promega).Theluminescencewasmeasuredfrom5.0µloflysateduring10sintegrationwithaluminometer(BeckmanCoulterLD400).Luciferaseactivitywasexpressedaslightunitsintegratedover10s(RLU)andnormalizedpermgofcellproteinbyusingtheBCAassay.Theerrorsbarsrepresentstandarddeviationderivedfromtriplicateexperiments.Luciferase-silencingefficiencywascalculatedrelativetountreatedcells.WhilePepMute™andDharmafect™4reagentsdeliveredsignificantgenesilencingfrom1.0nMofrenillaluciferasesiRNA,Lipofectamine™RNAiMAXgavegoodknockdownonlyafter20nMwhileenhancedgeneexpressionatlowconcentrationofsiRNA(0.5and1.0nMrespectively)wasobserved.



    Figure4.PepMute™TransfectionReagentknockeddownstableGFPexpressioninMCF7cell(upperpanel)andU2OScell(lowerpanel)byreverselytransfecting5.0and1.0nMGFPsiRNArespectively.Greenfluorescenceprotein(GFP)wasstablyexpressedinMCF7andU2OScells.siRNAtargetingGFPgene(rightpanel)andashamsiRNA(leftpanel)wereintroducedintoMCF7andU2OScellswithfinal5.0and1.0nMrespectivelybyreversetransfectionwithPepMute™TransfectionReagent.GFPgenesilencingwasmonitored48hposttransfectionbyaNikonfluorescencemicroscope.QuantitativeanalysisshowedthatGFPsiRNAat5.0and1.0nMdeliveredbyPepMute™siRNATransfectionReagentknockeddown90%and95%stablyexpressedGFPinMCF7andU2OScellsrespectively.

     
    温馨提示：不可用于临床治疗。

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