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请问,用T4连接酶连接以后,做转化时是否需要酒精纯化一下?还有一个问题,用T4聚合酶补平粘性末端以后,可以直接用来做连接吗?
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回复:时间:2008-06-19
我一般都是连接后直接用反应溶液进行转化的。转化大肠杆菌时只要有50ng质粒转入细菌即可完成成功克隆,因而不必为此再次纯化。乙醇沉淀后反而损失很大,不一定能保证转化结果了。
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