连接酶

TaKaRa T4 RNA Ligase T4 RNA连接酶 200U

产品描述

制品内容

T4RNALigase(10~50U/μl)200U

10×T4RNALigaseBuffer1ml

0.1%BSA*500μl

*BSA-20下易产生沉淀,应尽量避免多次反复冻融。短期使用请在4下保存。产生稍许沉淀不影响反应效果。

 

制品说明

本酶催化ATP降解为AMP和焦磷酸的反应,释放的能量能使寡核苷酸的5-P末端和3-OH末端结合,也能催化分子内连接的环化反应以及分子间的连接反应。最小底物为NpNpNOH(3-OHOligomer,受体)pNp(5′、3-DPmonomer,供体)。连接效率受供体和受体各自的碱基影响很大。与RNA相比DNA连接的效率较低。

 

注意事项

1.分子间连接反应的最适反应温度为515,若超过该温度活性会被抑制。

2.PEG共存的条件下能够促进反应,而反应特异性不变。为了提高连接反应效率,建议使用酶浓度高而ATP浓度尽量低的反应条件。

3.10×反应缓冲液中如果直接加入0.1%BSA会产生大量白色沉淀,因此在配制反应液时,请按下面顺序添加试剂:

   dH2O10×Buffer0.1%BSA→底物RNAorDNA

 

 

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