产品描述

制品内容

T4RNALigase(10~50U/μl)200U

10×T4RNALigaseBuffer1ml

0.1%BSA*500μl

*BSA在-20℃下易产生沉淀，应尽量避免多次反复冻融。短期使用请在4℃下保存。产生稍许沉淀不影响反应效果。

制品说明

本酶催化ATP降解为AMP和焦磷酸的反应，释放的能量能使寡核苷酸的5′-P末端和3′-OH末端结合，也能催化分子内连接的环化反应以及分子间的连接反应。最小底物为NpNpNOH(3′-OHOligomer，受体)、pNp(5′、3′-DPmonomer，供体)。连接效率受供体和受体各自的碱基影响很大。与RNA相比DNA连接的效率较低。

注意事项

1.分子间连接反应的最适反应温度为5～15℃，若超过该温度活性会被抑制。

2.在PEG共存的条件下能够促进反应，而反应特异性不变。为了提高连接反应效率，建议使用酶浓度高而ATP浓度尽量低的反应条件。

3.在10×反应缓冲液中如果直接加入0.1%的BSA会产生大量白色沉淀，因此在配制反应液时，请按下面顺序添加试剂：

   dH2O→10×Buffer→0.1%BSA→底物RNAorDNA。