连接酶

PUCT simple TA克隆试剂盒 pUCT Simple Cloning Kit 含载体、连接酶、感受态细胞)

产品描述

消除了pUC18载体上的多克隆酶切位点,大大提高酶切效率。

pUC18载体为基础构建而成,具有pUC18载体相似的功能。

 

组分说明:

组分                          含量         储存

pUC-Tsimple50ng/µl     20μl       -20

SolutionBuffer2×         150μl      -20

ConctrolInsert50ng/µl 10μl       -20

DH5αCompetentcell       10×100μl    -80

 

pUC-T simple TA载体是一种高效克隆PCR产物的专用载体,它是由pUC18载体在EcoRV酶切位点处切开,在两侧的3'端添加T而成。由于大部分耐热聚合酶反应时都会在PCR产物的3'端添加一个A,可以与pUC-T3'端的T互补连接,同时它消除了pUC18载体上的多克隆酶切位点,克隆后的PCR产物将无法使用载体上的限制酶切下,需要在PCR扩增引物上导入合适的酶切位点。此时如果使用PCR扩增引物导入的酶切位点进行DNA酶切时,酶切反应将不会受到T载体上其它多克隆酶切位点上的限制酶影响,可以大大提高酶切效率,增加亚克隆成功率。

试剂盒中配备了高效率的连接试剂,可以在短时间内完成连接反应。带有插入片段的重组子可根据α互补原理,进行蓝白斑筛选,判断载体中有无外源基因的插入。克隆后可以用BcaBEST SequencingPrimersM13通用引物对PCR产物进行测序。同时试剂盒中配备了经特殊工艺处理得到的DH5α感受态菌株,可以用于连接产物的高效热激转化。

 

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