该酶催化双链DNA或RNA上相邻的5´-磷酸末端和3´-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平齐末端或粘性末端之间的连接，还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA杂交双链中的单链切刻。

纯化自 E.coli C600pcl857pPLc28lig8。

1XT4DNA连接酶反应缓冲液
[50mMTris-HCl（pH7.5@25℃），10mMMgCl₂，10mMDTT，1mMATP]推荐DNA5´末端浓度为0.1-1.0μM，16℃温育。

65℃加热10分钟。

T4DNA连接酶经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。详情请登陆www.neb.com 或 www.neb-china.com。

1单位指在20μl1XT4DNA连接酶反应缓冲液中，16℃反应条件下，30分钟能使50%的经HindIII消化的λDNA片段[5´端浓度为0.12μM（300μg/ml）]连接所需的酶量。

400,000units/ml和2,000,000units/ml。

与 E.coli DNA连接酶需要NAD⁺ 作辅因子不同，T4DNA连接酶的辅因子是ATP。若需稀释T4DNA连接酶，推荐使用50%甘油贮存缓冲液（稀释缓冲液A，NEB#B8001）稀释，-20℃保存。如稀释后马上使用，也可用1XT4DNA连接酶反应缓冲液稀释。
只要在反应体系中补加1mMATP，连接反应就可以在NEB提供的四种限制性内切酶缓冲液或在T4DNA多聚核苷酸激酶反应缓冲液中进行。