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人牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)ELISA试剂盒操作要求
上海远慕生物详细为您介绍人牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)ELISA试剂盒操作要求,注意事项,用途,特点,规格,型号,品牌,说明书等详情,本司专业代理销售进口/国产ELISA试剂盒,质粒载体,溶液化学试剂,培养基,抗体,生化试剂,实验耗材,染色液,标准品对照品,动物血清血浆,抗生素,其他试剂,提供ELISA试剂盒免费代测服务,ELISA种属涵盖成千上万,本司促销活动下在进行中,订购!
人牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)ELISA试剂盒操作要求详细介绍:
中文名:人牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)ELISA试剂盒
别名:人牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)ELISAKit
供应商:上海远慕
规格:48t/96t
保存:2-8℃
有效期:6个月
适用范围:本试剂盒仅供科研使用,不得用于临床。
用途:用于测定人血清,血浆,组织及相关液体样本中的含量或活性。
特点:灵敏性高、特异性强、重复性好。
ELISA试剂盒种属:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、猪犬、牛羊、鸡鸭、植物ELISA试剂盒等。
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
本司ELISA试剂盒特性:
1、应尽量选择正规厂家,产品经相应政府部门审核认可,试剂应从灵敏度、特异性、精密度、稳定性、简便性、安全性及经济性全面评价。
2、灵敏度:有二层含义,1)为试剂检出被检物质的zui低量的能力;2)为试剂对大量样品中阳性检出的能力。
3、特异性:常用交叉反应率表示。含有与待测物相近结构部份的物质可能存在交叉反应,使测定结果升高,可能导致假阳性,所以交叉反应是评价其质量的关键指标。
4、精密度:ELISA试剂一般指其批内CV%,其值应小于15%;定量试剂应同时考察线性范围。
5、准确度:通过添加回收实验进行评价。
6、简便性:指在不影响试剂的前三项指标的前题下,实验和测定步骤越少越好,在定性实验中结果判断简单明了,定量试验结果计算也应简单。
7、安全性:指试剂对操作者和环境安全无害无传染性。
8、经济性:试剂在同等质量条件下通过大规模生产或技术进步降低成本,而市场价格比较合理。
9、试剂评价:需要有的确证方法和确证的样品进行检测。
人牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)ELISA试剂盒样品收集、保存方法:
1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液
5、 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
人牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)ELISA检测试剂盒原理:采用双抗体夹心ABC-ELISA法。
标本的处理:
(1)细胞培养上清液
根据需要用试剂盒中的标准稀释液稀释样品,然后按照说明书所述方法检测。推荐稀释浓度是稀释5倍。
(2)脑脊液
根据需要用试剂盒中的标准稀释液稀释样品,然后按照说明书所述方法检测。推荐稀释浓度是5倍。
(3)血浆
①用EDTA2K离心收集在真空血液收集管中的血液,5,000×g,15分钟,4℃,分离血浆样品,然后储存在零下80℃直到使用。
②用试剂盒中的标准稀释液55倍稀释血浆以避免血浆中的干扰物质影响检测,按照说明书指定方法检测。
人牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)ELISA试剂盒操作步骤:
1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。
人牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)ELISA试剂盒操作要求注意事项:
1)试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2)实验中不用的试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2)实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3)不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4)使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5)使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6)洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7)底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8)加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9)按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
人牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)ELISA检测试剂盒适用领域:
1.免疫酶染色各种细胞内成份的定位
2.研究抗酶抗体的合成
3.显现微量的免疫沉淀反应
4.定量检测体液中抗原或抗体成份
人牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)ELISA检测试剂盒性能:
1.灵敏度:zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2.特异性:不与其它细胞因子反应。
3.重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
人牛小肠碱性磷酸酶(CIAP)ELISA试剂盒组成:
1:预包被板:96T/48T
2:酶标记抗体:(30倍浓缩)HRPIgG,亲合纯化0.4mLx1
3:标准品:-60.5mLx2
4:EIA缓冲液:含1%BSA,0.05%吐温20BPS30mLx1
5:标记抗体稀释液:含1%BSA,0.05%吐温20BPS12mLx1
6:显色剂:TMB底物液15mLx1
7:终止液:1N硫酸12mLx1
8:浓缩洗涤液:(40倍浓缩)含1%BSA,0.05%吐温20BPS50mLx1
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