His标签单抗又叫6×His标签单抗，或6×His单克隆抗体，用小鼠制备，HIS可被镍柱吸附，用于纯化重组蛋白。

• 中文名

• His标签单抗

• 外文名

• anti-6*Histagmonoclonalantibody

• 又叫

• 6×His标签单抗

1. 1定义

2. 2标签鼠单抗

3. 3背景介绍

His标签单抗，又叫6×His标签单抗，或6×His单克隆抗体，英文全称为anti-6*Histagmonoclonalantibody，因为制备单抗的实验动物多为小鼠，所以小鼠来源的His标签抗体英文全称为Mouseanti-6*Histagmonoclonalantibody。目前市场上用到的His标签单抗基本都是用小鼠制备的，尚未有商品化的兔源His标签单抗。

以实验小鼠为宿主制备的His标签单抗叫His标签鼠单抗。其制备方法通常是这样的：人工合成6*His多肽，即氨基酸序列为HHHHHH的多肽，必要时在末端添加偶联载体用到的特殊氨基酸。合成好此多肽后，通过化学方法将此多肽与载体蛋白偶联（如KLH、BSA、OVA等），偶联完成后，再用偶联好的全抗原免疫实验小鼠，免疫结束后杀死免疫好的小鼠，无菌条件下取脾脏，与骨髓瘤细胞进行融合，用ELISA或者其它手段进行筛选出阳性的克隆，筛选到的细胞经过克隆化后即形成稳定的细胞株，将此细胞株进行体外培养或小鼠体内诱生腹水形成，再从培养基或者腹水中纯化即可得到His标签鼠单抗，再用Westernblot或其它手段进行鉴定即可。^[1]目前世界上有很多公司都提供商品化的His标签单抗，右图是ProteinTechGroup的His标签单抗（产品编号66005-1-Ig）的Westernblot结果，可见在曝光时间为1min的情况下，抗体稀释16万倍仍可检测到很强信号。^[2]

ProteintechHis标签单抗质检数据

His标签是蛋白质重组技术中经常用到的一种标签，其序列为六个组氨酸HHHHHH，其特点是分子量小，基本不改变蛋白质的生物结构，不改变蛋白质的溶解性，更重要的是它使蛋白质的纯化变得极为方便，根据组氨酸上的咪唑环可以与二价金属离子结合的原理，人们可以利金属离子亲和层析技术纯化带有His标签的蛋白，即将含有目的蛋白的裂解液通过固定的二价金属离子（通常是二价Ni离子）填料，带有6*his标签的蛋白质即与填料结合，其它蛋白不与填料结合，最后再用高浓度的咪唑即可将目的蛋白洗脱下来。^[3]

His标签单抗可以用来鉴定His标签的蛋白质的表达情况（如目的蛋白的相对表达量、分子量）、在细胞中的定位以及其它特性。

• 参考资料

• 
  

• 1.J.E.科学根，D.H.马古利斯．精编免疫学实验指南．北京：科学出版社，2009：18-33

• 2.Histagantibody．Proteintech[引用日期2012-06-28]

• 3.Polyhistidine-tag．Wikipedia[引用日期2012-06-28]