2021-07-21单克隆抗体饲养细胞

展开引用亦静依稀 大家好，最近在做单抗，里面有些问题一直想不通，我想请大神帮忙一下，想问一下饲养细胞加少了是大概多少，我一直6周龄的balb/C，刚拿回来就取饲养细胞了，然后取了3毫升，注射到60毫升的HAT中铺了六块板子，这个量多么，么有细胞计数，至今细胞计数不是很会，去想问你们第二天去看板子是时候，底下会有雾一样的细胞么，细胞多的地方你们的液体上清会有点变色么，要一点不变色的是好的，还是细胞上清稍微变色是正常的呢谢谢大神指导......求不沉

最好寄个数，也不太麻烦啊，这样直接加里不知道你取的细胞量是多少。1e5个/ML一般情况下，一只鼠铺5~6块还可以吧（考虑到含有杂细胞）第二天培养基会稍微变色的

展开引用亦静依稀大家好，最近在做单抗，里面有些问题一直想不通，我想请大神帮忙一下，想问一下饲养细胞加少了是大概多少，我一直6周龄的balb/C，刚拿回来就取饲养细胞了，然后取了3毫升，注射到60毫升的HAT中铺了六块板子，这个量多么，么有细胞计数，至今细胞计数不是很会，去想问你们第二天去看板子是时候，底下会有雾一样的细胞么，细胞多的地方你们的液体上清会有点变色么，要一点不变色的是好的，还是细胞上清稍微变色是正常的呢谢谢大神指导......铺六块板子没有问题，如果只有几个孔颜色发黄，考虑污染的问题。

展开引用哲尔亦静依稀大家好，最近在做单抗，里面有些问题一直想不通，我想请大神帮忙一下，想问一下饲养细胞加少了是大概多少，我一直6周龄的balb/C，刚拿回来就取饲养细胞了，然后取了3毫升，注射到60毫升的HAT中铺了六块板子，这个量多么，么有细胞计数，至今细胞计数不是很会，去想问你们第二天去看板子是时候，底下会有雾一样的细胞么，细胞多的地方你们的液体上清会有点变色么，要一点不变色的是好的，还是细胞上清稍微变色是正常的呢谢谢大神指导铺六块板子没有问题，如果只有几个孔颜色发黄，考虑污染的问题。......你好我仔细看了没有污染，现在已经第三天了，上清又明显变黄了，里面细胞都挤满了，我这时候要补加培养基吗

展开引用SyCellCulture最好寄个数，也不太麻烦啊，这样直接加里不知道你取的细胞量是多少。1e5个/ML一般情况下，一只鼠铺5~6块还可以吧（考虑到含有杂细胞）第二天培养基会稍微变色的......细胞计数得话大概一块板子多少个饲养细胞啊

展开引用亦静依稀SyCellCulture最好寄个数，也不太麻烦啊，这样直接加里不知道你取的细胞量是多少。1e5个/ML一般情况下，一只鼠铺5~6块还可以吧（考虑到含有杂细胞）第二天培养基会稍微变色的细胞计数得话大概一块板子多少个饲养细胞啊......我现在第三天融合的细胞上清已经开始明显变黄了，细胞在里面也挤满了。

展开引用亦静依稀哲尔亦静依稀大家好，最近在做单抗，里面有些问题一直想不通，我想请大神帮忙一下，想问一下饲养细胞加少了是大概多少，我一直6周龄的balb/C，刚拿回来就取饲养细胞了，然后取了3毫升，注射到60毫升的HAT中铺了六块板子，这个量多么，么有细胞计数，至今细胞计数不是很会，去想问你们第二天去看板子是时候，底下会有雾一样的细胞么，细胞多的地方你们的液体上清会有点变色么，要一点不变色的是好的，还是细胞上清稍微变色是正常的呢谢谢大神指导铺六块板子没有问题，如果只有几个孔颜色发黄，考虑污染的问题。你好我仔细看了没有污染，现在已经第三天了，上清又明显变黄了，里面细胞都挤满了，我这时候要补加培养基吗......这样子的话，那就是细胞的密度比较高，培养基的营养不够，可以适当提高血清浓度。

展开引用亦静依稀亦静依稀SyCellCulture最好寄个数，也不太麻烦啊，这样直接加里不知道你取的细胞量是多少。1e5个/ML一般情况下，一只鼠铺5~6块还可以吧（考虑到含有杂细胞）第二天培养基会稍微变色的细胞计数得话大概一块板子多少个饲养细胞啊我现在第三天融合的细胞上清已经开始明显变黄了，细胞在里面也挤满了。......是不是杂细胞太多呢？每个孔的密度是1e5/ml

展开引用SyCellCulture亦静依稀亦静依稀SyCellCulture最好寄个数，也不太麻烦啊，这样直接加里不知道你取的细胞量是多少。1e5个/ML一般情况下，一只鼠铺5~6块还可以吧（考虑到含有杂细胞）第二天培养基会稍微变色的细胞计数得话大概一块板子多少个饲养细胞啊我现在第三天融合的细胞上清已经开始明显变黄了，细胞在里面也挤满了。是不是杂细胞太多呢？每个孔的密度是1e5/ml......对就是杂细胞太多了，我现在第五天了底下雾蒙蒙的，这是hat失效了么还是因为我的饲养细胞太少了

展开引用哲尔亦静依稀哲尔亦静依稀大家好，最近在做单抗，里面有些问题一直想不通，我想请大神帮忙一下，想问一下饲养细胞加少了是大概多少，我一直6周龄的balb/C，刚拿回来就取饲养细胞了，然后取了3毫升，注射到60毫升的HAT中铺了六块板子，这个量多么，么有细胞计数，至今细胞计数不是很会，去想问你们第二天去看板子是时候，底下会有雾一样的细胞么，细胞多的地方你们的液体上清会有点变色么，要一点不变色的是好的，还是细胞上清稍微变色是正常的呢谢谢大神指导铺六块板子没有问题，如果只有几个孔颜色发黄，考虑污染的问题。你好我仔细看了没有污染，现在已经第三天了，上清又明显变黄了，里面细胞都挤满了，我这时候要补加培养基吗这样子的话，那就是细胞的密度比较高，培养基的营养不够，可以适当提高血清浓度。......细胞半换液也能提高hat浓度么

杂细胞多的话就得优化你的巨噬细胞提取方法，还有再说一遍细胞计数的问题，你计数就把杂细胞计算在内了，就不存在因为巨噬细胞太多而使细胞营养消耗太大的问题。还有看你的培养基颜色太黄了，不是有半换液这一步么？可以换液啊，不一定是你的HAT出现问题。

特别黄那几个是污染了么？如果不是就是没有铺匀，再找点文献看看，做单抗挺费劲的

SyCellCulture特别黄那几个是污染了么？如果不是就是没有铺匀，再找点文献看看，做单抗挺费劲的铺匀是饲养细胞没有铺匀么？还是什么没有铺匀。。。

展开引用亦静依稀SyCellCulture特别黄那几个是污染了么？如果不是就是没有铺匀，再找点文献看看，做单抗挺费劲的铺匀是饲养细胞没有铺匀么？还是什么没有铺匀。。。......都有可能啊。。

展开引用SyCellCulture杂细胞多的话就得优化你的巨噬细胞提取方法，还有再说一遍细胞计数的问题，你计数就把杂细胞计算在内了，就不存在因为巨噬细胞太多而使细胞营养消耗太大的问题。还有看你的培养基颜色太黄了，不是有半换液这一步么？可以换液啊，不一定是你的HAT出现问题。......现在已经到了半换液了这样黄的液体我是最好每个孔补加还是用将里面的液体吸出来一半再补加比较好呢

SyCellCulture特别黄那几个是污染了么？如果不是就是没有铺匀，再找点文献看看，做单抗挺费劲的技术我一般只记饲养细胞的量了，融合后细胞就没记过数

亦静依稀现在已经到了半换液了这样黄的液体我是最好每个孔补加还是用将里面的液体吸出来一半再补加比较好呢吸出来再补加

展开引用亦静依稀哲尔亦静依稀哲尔亦静依稀大家好，最近在做单抗，里面有些问题一直想不通，我想请大神帮忙一下，想问一下饲养细胞加少了是大概多少，我一直6周龄的balb/C，刚拿回来就取饲养细胞了，然后取了3毫升，注射到60毫升的HAT中铺了六块板子，这个量多么，么有细胞计数，至今细胞计数不是很会，去想问你们第二天去看板子是时候，底下会有雾一样的细胞么，细胞多的地方你们的液体上清会有点变色么，要一点不变色的是好的，还是细胞上清稍微变色是正常的呢谢谢大神指导铺六块板子没有问题，如果只有几个孔颜色发黄，考虑污染的问题。你好我仔细看了没有污染，现在已经第三天了，上清又明显变黄了，里面细胞都挤满了，我这时候要补加培养基吗这样子的话，那就是细胞的密度比较高，培养基的营养不够，可以适当提高血清浓度。细胞半换液也能提高hat浓度么......我一般是这么操作的：周一接种融合细胞，周四全量换液（ht），下周二左右检测。根据你的问题，可以周三半量换（hat），周五换ht，下周一再根据具体情况需不需要再半量换液或者直接检测。

展开引用哲尔亦静依稀哲尔亦静依稀哲尔亦静依稀大家好，最近在做单抗，里面有些问题一直想不通，我想请大神帮忙一下，想问一下饲养细胞加少了是大概多少，我一直6周龄的balb/C，刚拿回来就取饲养细胞了，然后取了3毫升，注射到60毫升的HAT中铺了六块板子，这个量多么，么有细胞计数，至今细胞计数不是很会，去想问你们第二天去看板子是时候，底下会有雾一样的细胞么，细胞多的地方你们的液体上清会有点变色么，要一点不变色的是好的，还是细胞上清稍微变色是正常的呢谢谢大神指导铺六块板子没有问题，如果只有几个孔颜色发黄，考虑污染的问题。你好我仔细看了没有污染，现在已经第三天了，上清又明显变黄了，里面细胞都挤满了，我这时候要补加培养基吗这样子的话，那就是细胞的密度比较高，培养基的营养不够，可以适当提高血清浓度。细胞半换液也能提高hat浓度么我一般是这么操作的：周一接种融合细胞，周四全量换液（ht），下周二左右检测。根据你的问题，可以周三半量换（hat），周五换ht，下周一再根据具体情况需不需要再半量换液或者直接检测。......那你们有木有到第七天了里面还是很多死去的未融合的细胞，还有些活着的细胞在里面，但是上清挺黄的

展开引用亦静依稀哲尔亦静依稀哲尔亦静依稀哲尔亦静依稀大家好，最近在做单抗，里面有些问题一直想不通，我想请大神帮忙一下，想问一下饲养细胞加少了是大概多少，我一直6周龄的balb/C，刚拿回来就取饲养细胞了，然后取了3毫升，注射到60毫升的HAT中铺了六块板子，这个量多么，么有细胞计数，至今细胞计数不是很会，去想问你们第二天去看板子是时候，底下会有雾一样的细胞么，细胞多的地方你们的液体上清会有点变色么，要一点不变色的是好的，还是细胞上清稍微变色是正常的呢谢谢大神指导铺六块板子没有问题，如果只有几个孔颜色发黄，考虑污染的问题。你好我仔细看了没有污染，现在已经第三天了，上清又明显变黄了，里面细胞都挤满了，我这时候要补加培养基吗这样子的话，那就是细胞的密度比较高，培养基的营养不够，可以适当提高血清浓度。细胞半换液也能提高hat浓度么我一般是这么操作的：周一接种融合细胞，周四全量换液（ht），下周二左右检测。根据你的问题，可以周三半量换（hat），周五换ht，下周一再根据具体情况需不需要再半量换液或者直接检测。那你们有木有到第七天了里面还是很多死去的未融合的细胞，还有些活着的细胞在里面，但是上清挺黄的......不存在这个问题，请好好看一下原理。

5天时间应该应该很多细胞都死了，存活下来的也就几簇才对，雾蒙蒙的可能是细胞太多了才出现的现象，可能HAT有问题，没杀死，饲养层细胞最好每孔10000个，多了板子空间被占，少了达不到效果，希望对你有用

chengxiawei20145天时间应该应该很多细胞都死了，存活下来的也就几簇才对，雾蒙蒙的可能是细胞太多了才出现的现象，可能HAT有问题，没杀死，饲养层细胞最好每孔10000个，多了板子空间被占，少了达不到效果，希望对你有用嗯嗯

板子看起来是污染的迹象，一般情况，即使细胞特别多，培养基是澄清透亮的。一只鼠铺6块板子是可以的