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Tris 平衡酚
介绍Introduction 在分子生物学实验中通常要使用有机***酚用于核酸的提取及纯化。但是工业生产的初级结晶***酚通常含有杂质及氧化产物,而这些东西是会严重影响核酸的质量的,因此***酚在使用前必须经过蒸馏以去除***酚中的杂质及氧化产物。但是由于***酚的沸点是181.8℃左右,且又是一种强烈腐蚀性易挥发的化学试剂,所以在做***酚溶液的过程是一项耗时又危险的过程,且在做的过程中的预防措施比如戴防护眼镜、手套,通风柜等都是必须的。
特点Features• 产品齐全。我们所提供的产品包含平衡酚、预混合酚、饱和酚等。• 在ISO9001质量保障体系及严格的质量控制下生产。• 可用于RNA、DNA的提取,无RNase、DNase酶污染• 为客户避免了各种复杂、危险的处理问题,并提供了一个更加方便、安全和容易选择的酚溶液。
操作说明Procedure 通常用一系列有特定pH的酚和酚氯仿试剂抽提细胞、组织、细菌、病毒、真菌、植物等中的核酸,***酚和氯仿都能使蛋白质变性,并使其溶于有机相或中间相内,而核酸只溶于水相,在离心之后溶于水相的核酸可再次用等体积的氯仿:异戊醇抽提(1,2,3)。 在RNA的提取中以上这些抽提步骤主要是考虑到减少RNA的损失,由于不溶性蛋白与mRNA的复合物主要存在于中间相内。氯仿能增加核酸的提取效率,主要是因为氯仿能减少mRNA在中间相的损失。氯仿的作用是能使不溶性蛋白变性并能帮助去除脂类,因而能促进核酸在水相内的分布,相分离也就能提高,使水相能尽量减少与有机相的交叉污染。 通常异戊醇也会被加入到酚:氯仿中以减少乳化现象。
应用Applications 在不同的酚pH下,DNA即会被分配到有机相也会被分配到水相(5,6),为了选择最适合你应用的酚溶液,就必须理解在核酸提取中pH对酚功能的影响,DNA是依靠pH来分配的,在pH7.0或者更高时DNA和RNA都被分配到水相中,在酸性pH低于7.0时,DNA会被变性并被分配到有机相和中间相,只剩RNA存在于水相。在很多DNA提取过程中使用pH8.0的酚:氯仿:异戊醇。在需要去除大部分的DNA以提取纯的总RNA时,可以使用酸性酚或酸性酚:氯仿溶液。氯仿能帮助减少mRNA的损失,由于mRNA与不溶蛋白的复合物会被分配到中间相内。(当提取的总RNA中有少量基因组DNA的污染时对Northernblotting、nucleaseprotectionassays的结果是不会有影响)。
名称 | 应用 | 备注 | ||
平衡酚EquilibratedwithTris-HCl,pH8.0,1.0mMEDTA,PhenolphasepH7.8±0.2 | 核酸提取(DNA/RNA) | |||
饱和酚SaturatedwithcitratebufferpH4.3±0.2 | RNA提取从RNA溶液内去除DNA | 在酸性条件下DNA被分配到有机相需要用到氯仿和异戊醇氯仿和异戊醇能增加界面的稳定性,并能防止在混合时的起泡 | ||
酚:氯仿:异戊醇(25:24:1)EquilibratedwithTris-HCl,pH8.0,1.0mMEDTA,PhenolphasepH7.8±0.2 | 核酸提取(DNA/RNA) | 氯仿和异戊醇能增加界面的稳定性,并能防止在混合时的起泡 |
Cat# | 产品名称 | 规格 | 价格 | 备注 |
BSA02M1 | Tris平衡酚,pH8.0 | 100ml | ¥100.00 | |
BSA03M1 | 酚:氯仿:异戊醇(25:24:1) | 100ml | ¥100.00 | |
BSA04M1 | 柠檬酸盐饱和酚,pH4.3±0.2 | 100ml | ¥100.00 | |
BSA05M1 | 水平衡酚 | 100ml | ¥100.00 | 以上产品在未开盖4℃下能稳定保存>6个月。 参考文献References• Ausubel,F.A.,Brent,R.,Kingston,R.E.,Moore,D.D.,Seidman,J.G.,Smith,J.A.,Struhl,K.,(1987)CurrentProtocolsinMolecularBiology.• Kleinhenz,E.A.,andCohen,S.B.(1991)Biotechniques.10:740.• Wallace,D.M.(1987)MethodsinEnzymology152:33.• Sambrook,J.,Fritsch,E.F.,Maniatis,T.,(1989)MolecularCloning:ALaboratoryManual3ndEdition.• Perry,R.P.,Torre,J.La,Kelly,D.E.,andGreenberg,J.R.(1972)Biochem.Biophys.Acta262,220.• Brawerman,G.,Mendecki,J.,andLee,S.Y.(1972)Biochemistry11,637.
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